研域生物大鼠原代腎足細胞實驗過程詳細介紹如下:
1. 用無菌器械取出胚胎,放在無菌的培養皿中。
2. 取下胚胎的頭,放在盛有4ml不含 Ca2+和Mg2+的平衡鹽溶液(BSS)的培養皿中。
3. 從頭顱骨上取下,放在35mm培養皿中的BSS液滴上,培養皿中半裝滿 Paraplast(Sigma)。
4. 在顯微鏡下剝離腦膜,取下海馬體,放在裝有BSS的 35 mm 培養皿中。
5. 海馬體在新鮮配制的 0.25% 胰酶BSS溶液中37℃ 孵育15分鐘。
6. 小心吸掉胰酶溶液,加入5mlBSS,層流柜中室溫放置5分鐘。重復此步兩次或更多次,最后加入2mlBSS。
7. 首先用普通巴斯德吸管分離細胞,然后換用一支用火燒平、內徑縮小一半的吸管。
8. 計數細胞,確定細胞密度。
9. 所需數目的細胞懸浮于接種培養基中,接種培養皿中poly-L-lysine 預處理的蓋玻片。如果用于生化實驗,細胞直接接種 poly-L-lysine 處理的培養皿。
10. 2~4 小時后,蓋玻片轉移至含有單層神經膠質的培養皿中,培養皿中是維持培養基。
11. 每周更換3ml培養液。
上海研域實業有限公司是一家科研和銷售科學試劑產品,領域涵蓋化學、分析化學、生命科學和材料科學等基礎創新領域,助力客戶的研究計劃。公司產品有ELISA試劑盒、大鼠原代腎足細胞細胞培養、各類生化試劑、金標檢測試劑盒、食品檢測試劑盒、分子生物學試劑盒、胎牛血清、科研抗體、生物耗材等。
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