近些年的體外診斷，接連遇到分子診斷和POCT即時診斷兩個重要風口，凍干形式的分子診斷試劑在全球受到了越來越多的應用。凍干關鍵原料的選擇和研制，影響體外診斷試劑各個項目的性能水平和應用價值，篩選到合適的原料是最重要的研發工作，也是診斷試劑成本構成的最主要部分。

凍干試劑的研發包括原料與輔料的選擇、研發工藝與設備的選擇等，由于各個領域交叉相互干擾，研發周期可能會失控。以凍干原料篩選過程為例，凍干原料的篩選涉及原酶開發、原酶篩選、試劑開發、凍干打樣測試等環節。具體篩選過程如下圖所示：

圖1.凍干原料篩選過程

那如何能夠快速研發出分子診斷凍干試劑呢？

可以考慮市面上用標準引物探針測試過凍干前后性能均穩定的試劑原料、凍干保護劑，參考凍干工藝，再搭配具體項目的引物探針進行測試，若測試通過則可以安排全體系凍干微芯打樣實驗，并測試性能，性能通過即可轉產放大，若測試不通過則可以與原料廠家進行定制化的優化調試。

翌圣生物作為深耕于上游生命科學領域酶制劑的供應商，長期為IVD公司提供高品質、高性價比的原料酶。且可為客戶提供定制優化服務，盡可能縮短凍干試劑的研發周期。

Hifair® Lyo Multiplex One Step RT-qPCR Kit（Cat#11831）

該原料含有基因改造的雙封閉抗體封閉的Taq酶及深度優化的多重反應緩沖體系，可極大地提高擴增靈敏度和特異性。由4×buffer、酶mix及凍干保護劑三個組分組成，便于液體版各組分體系微調。既可作為液體試劑直接使用，同時匹配凍干保護劑，可以直接用于凍干，進行凍干產品的開發。

圖2. 使用Yeasen的RNA可凍干試劑（Cat#11831ES）分別進行原位凍干和凍干微芯，觀察凍干產品的凍干形態：凍干后凍干形態良好，原位凍干表面無塌陷，管內無空隙；凍干球形態飽滿圓滑，大小均一。

圖3.使用Yeasen的RNA可凍干試劑（Cat#11831ES）凍干成凍干微芯后，在不同條件下（正常保存為T0時刻，50℃加速14天及25天）進行處理，同時擴增105 、104、103 copies/mL的新冠假病毒模板，結果顯示：凍干微芯熱加速前后Ct值、熒光值、球形等均無顯著變化，凍干產品穩定性良好。

圖4.使用Yeasen的RNA可凍干試劑（Catt#11831ES）凍干成凍干微芯后，進行熱加速處理，同時使用普通程序和超快速程序檢測IVA、IVB 及內參模板，兩者Ct值、熒光值無顯著差異。由此可見：11831 ES凍干微芯T0時刻及熱加速后的產品，兼容常規程序和快速程序，性能穩定。