隨著細胞治療等生物醫藥產業迅猛發展，各國法規和相關機構，也逐步加強了，對生物制品安全性和可靠性的監管。其中支原體檢測，是一個關鍵項目。在各國藥典中均指出，可以使用經過方法學驗證的核酸法，可替代培養法和指示細胞法，對相關生物產品進行支原體檢測。因此，在進行支原體檢測實驗時，應選擇通過方法學驗證的qPCR試劑盒，兼顧靈敏度和特異性，實現高效且精準的檢測。

如何實現檢測的高效與精準

生物試劑，尤其是具有活性或功能的試劑，對于產品的劑型、儲存方法、運輸溫度都有比較高的要求。

劑型決定了產品本身是否穩定，而穩定性又進一步決定了產品儲存和運輸甚至是使用方法的難易程度。穩定性越好的產品，對于儲存、運輸過程的溫度要求相對更簡單，操作難度小，產品則更易保留更大的活性，更容易實現高效且精準的qPCR檢測結果。

qPCR液體試劑

用于方法驗證的支原體檢測試劑盒以qPCR法為主。目前，市場上大多數支原體檢測類的qPCR試劑盒，其試劑多以液體劑型為主。液體液試劑的特點

實際生產、運輸、使用過程中，液體試劑很容易發生失活的情況：

液體活性試劑需要-20℃儲存，在運輸過程中，為了保持溫度，往往需要干冰運輸，而干冰易揮發，增加了運輸難度。在使用過程中，也需要先在冰上結凍，再使用，再次增加了反復凍融帶來的失活風險。

qPCR凍干粉試劑

為了克服液體試劑的缺點，盡可能保留生物試劑的活性不因溫度的改變而被破壞，德國MB公司的qPCR檢測試劑盒，采用了新型的凍干粉劑型。

凍干粉試劑由于去除水分，可以更好地保持物質活性，防止微生物生長、減緩氧化反應，相較于液體試劑更不容易失活，更適合長期保存、遠距離運輸或高靈敏度的實驗。

穩定性強：凍干粉試劑在制備過程中經過冷凍和真空干燥處理，去除了水分，活性物質處于“休眠狀態”，進而有助于提高試劑的穩定性。避免了液體試劑可能受到環境濕度、溫度等因素的影響，容易發生降解，從而影響實驗結果的缺點。

運輸條件相對簡單：因此相比于液體試劑，凍干粉試劑更適合長期存儲和運輸，對溫度的要求也寬松，4℃（冷鏈溫度：2-8℃）即可，減少了對冷凍設備的依賴，操作運輸簡便且容錯率高，避免了液體試劑保存過程中可能引起的失活可能性。

降低污染可能性，適合長期儲存和長時間運輸，結果更可靠：由于水分被去除，也減少了其中微生物生長繁殖的可能性，降低了試劑被微生物污染的風險。因此，與液體試劑相比，凍干粉試劑更適合長期保存與運輸，進一步提高結果的可靠性。

降低氧化反應：水溶液的存在，容易促使一些氧化反應的發生，從而導致試劑失活。凍干粉中的低水分含量有助于防止這些氧化反應的發生，維持試劑的活性。

復溶后即可開始實驗，易于配制：凍干粉試劑的配制相對簡單，只需加入適量的溶劑即可重新溶解。這不僅減少了操作過程中的出錯可能性，還降低了試劑的使用成本。相比之下，液體試劑的配制可能需要更多的步驟，而且容易受到人為誤差的影響。此外，凍干粉試劑無需冷藏，便于儲存和運輸，為實驗室提供了更靈活的管理選擇。

綜上所述，相較于液體試劑，凍干粉試劑是qPCR實驗中更好的選擇，尤其是在支原體檢測方法驗證這類對于實驗靈敏度、特異性等方面有高要求的實驗中。然而，凍干粉試劑的制作，對于工藝的要求更高，需要保證試劑的活性不在制作過程中造成損失。市面上，德國Minerva Biolabs公司，專注于支原體qPCR凍干粉試劑（Venor Gem qEP）工藝，使用時復溶即可，盡可能保持試劑的更高活性，為支原體檢測提供更穩定準確的結果，完成高靈敏度、強特異性的方法驗證，遵循歐洲藥典流程要求，已幫助國內外眾多項目通過方法學驗證。