皖儀科技離子色譜法測定乳粉中的膽堿含量

膽堿由 Adolph Strecker 于1849年從豬膽汁中分離得到，故又名膽素，直至上世紀三十年代才逐步明確其營養價值和作用。膽堿在人體的生產發育過程中起著至關重要的作用，研究表明，膽堿對于大腦的發育及代謝、神經系統信息傳遞、視力的增強以及鈣的代謝等功能均有積極的促進和改善效能。此外膽堿能夠影響胎兒的大腦發育，增強寶寶的記憶力，對神經管的閉合起到關鍵作用；缺乏膽堿可能會導致記憶力損傷、腎臟損害、干細胞受損及引起心腦血管疾病。膽堿在食品領域主要應用于在嬰幼兒配方食品和孕婦妊娠期及哺乳期食品中，是嬰幼兒配方食品中必須添加的一種營養物質。人體內膽堿的主要源自于自身合成和食物獲取，一般不會出現膽堿缺乏，但對于嬰幼兒來說，其自身合成膽堿的能力有限，特別是在母乳不足的情況下，其機體所需膽堿的來源主要是嬰幼兒配方食品，故對嬰幼兒配方食品中膽堿含量的監測具有重要意義。

國內目前關于奶粉中的膽堿含量檢測方法的報道較少。傳統方法主要有高氯酸非水滴定法、雷氏鹽重量法等；現代膽堿含量的檢測方法有離子色譜法、雷氏鹽比色法、高壓液相色譜-電化學檢測法、化學發光法等。膽堿是堿性強度與氫氧化鈉相似的一種含氮的有機堿性化合物，在水溶液中可以完全電離。所以可以采用離子色譜法，用陽離子交換柱測定膽堿的含量。該方法線性良好，重復性穩定，適合奶粉中膽堿含量的日常檢測。

1 實驗方法

1.1測試條件

儀器：IC6200系列離子色譜儀配置陽離子抑制器；

色譜柱：陽離子色譜柱（4.0*250mm）；

保護柱：皖儀諾譜;MS-5CG（4.0mm*30mm）；

柱溫：30℃；流速：1.0mL/min；

進樣量：100μL；

檢測器：電導檢測器。

1.2 使用試劑

淋洗液：15mmol/L甲烷磺酸溶液；

標樣：膽堿標準工作溶液（100mg/L）；

樣品：羊奶粉。

1.3 標樣制備

1.3.1 膽堿標準曲線溶液配制分別精密移取0.2mL、0.5mL、1.0mL、2.5mL、5.0mL膽堿標準工作溶液，置于5個100mL容量瓶中，用15mmol/L的甲烷磺酸溶液定容至標線，混勻，即得。

1.3.2 樣品溶液配制精密稱取適量樣品于比色管中，水浴酸水解；稀釋適當倍數，過C18柱和濾膜，即得。

2 測試結果

2.1 線性測試

2.1.1 膽堿線性測試標準曲線系列濃度見表1。

按照1.1的測試條件進行測試，得到標準曲線譜圖多點重疊譜圖如圖1。

                  圖1

膽堿在該色譜條件下標準曲線線性相關系數R2大于0.999，線性良好，膽堿線性方程如下圖2。

                  圖2

2.2 檢出限測試

配制0.02mg/L的標準溶液，按照“1．1”項色譜條件，注入該濃度標準溶液進樣分析，標準譜圖見圖3。檢出限數據見表2。

                 圖3

2.3 樣品測試

按照“1．1”項色譜條件，連續注入數針樣品溶液進樣分析，重復性譜圖見圖4。重復性數據見表3。

                  圖4

3 總結

本次建立的離子色譜法檢測乳粉中的膽堿，線性良好，重復性穩定，靈敏度高，滿足測試需求，可供參考。