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Chondrex膠原抗體誘導(dǎo)小鼠關(guān)節(jié)炎模型之CAIA實驗方案
PROTOCOL TO INDUCE CAIA
CAIA實驗方案
Chondrex公司建議尾靜脈注射單克隆抗體合劑。對于易感品系，可采用腹腔注射，但是通過腹腔注射CAIA誘發(fā)的炎癥嚴重程度往往較低，關(guān)節(jié)炎持續(xù)時間也較短。請根據(jù)實驗?zāi)康倪x擇合適的實驗方案。
| Catalog Number | Amount |
| 53100 | 100mg |
| 53040 | 40mg |
| 53010 |
A. Inducing CAIA without LPS
膠原抗體誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎
在易感品系DBA/1和Balb/c小鼠中采用CAIA建立關(guān)節(jié)炎模型，根據(jù)動物供應(yīng)商，動物周齡和體積大小的不同，每只小鼠需注射6-10mg單克隆抗體合劑。例如，初次注射免疫5mg抗體合劑后24小時再次注射5mg抗體合劑。關(guān)節(jié)炎會在二次免疫后的24-48小時后發(fā)生。研究員需要根據(jù)實驗?zāi)康恼{(diào)整實驗方案。
B. Inducing CAIA with LPS
膠原抗體聯(lián)用LPS誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎
細菌毒素LPS（B細胞分裂素）， MAM(支原體產(chǎn)生的T細胞分裂素)或SEB(金黃色葡萄球菌產(chǎn)生的T 細胞分裂素)和膠原抗體在誘發(fā)關(guān)節(jié)炎中具有協(xié)同效應(yīng)。在這些毒素的存在下，誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎的抗體合劑的量可降低。例如，每只小鼠初次免疫注射1.5mg抗體合劑后第三天注射25-50µgLPS，對于易感品系小鼠（Balb/c, DBA/1,B10.RIII, and C.B-17 scid/scid mice），關(guān)節(jié)炎的發(fā)生率高達100%。在C57BL/6小鼠尾部靜脈注射5mg抗體合劑，關(guān)節(jié)炎在初次免疫后第7-10天達到最嚴重， 可維持兩周。在初次免疫第10或14天注射25-50µgLPS, 關(guān)節(jié)炎會持續(xù)惡化。盡管三周后炎癥反應(yīng)有所緩解，關(guān)節(jié)破壞是永-久性的，甚至導(dǎo)致關(guān)節(jié)強直。
EVALUATING ARTHRITIS
關(guān)節(jié)炎評估
關(guān)節(jié)炎可通過臨床評分來定性評估或用測厚儀來測量爪子厚度來評估。由于小鼠的爪子太小，因此無法像測量大鼠爪子體積那樣通過浸沒法測定小鼠爪子體積。
Chondrex公司提供以下評分系統(tǒng)（表二）
表二 關(guān)節(jié)炎炎癥程度的臨床評分
| 得分 | 發(fā)病情況 |
| 0 | Normal 正常 |
| 1 | Mild, but definite redness and swelling of the ankle or wrist, or apparent redness and swelling limited to individual digits, regardless of the number of affected digits 輕度的、踝關(guān)節(jié)、腕關(guān)節(jié)發(fā)紅、腫脹 |
| 2 | Moderate redness and swelling of ankle or wrist 踝關(guān)節(jié)或腕關(guān)節(jié)中度發(fā)紅腫脹 |
| 3 | Severe redness and swelling of the entire paw including digits 爪子嚴重發(fā)紅、腫脹，包括指端 |
| 4 | Maximally inflamed limb involving multiple joints 四肢最-大-程-度發(fā)炎，包括多關(guān)節(jié) |
表三 成功阻斷單克隆抗體誘發(fā)的關(guān)節(jié)炎的藥物
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