問：傳統酶切酶連要花好久的時間，光是載體、片段酶切都要花上1-2個小時，還要純化片段，T4 DNA連接酶的連接甚至需要過夜，能不能有一款試劑省去這些步驟呀？

小翌：不用擔心，小翌這里有一款產品，Hieff Clone®系列克隆試劑盒僅需一步就能幫您連接上載體和片段，單片段的連接時間快至5分鐘，大幅度節省您的科研時間！

問：現在實驗室都是送樣測序，可是平板上的菌落數長得太少，無法確定一次連接成功，而送一次平板測序價格又很高，重新送測又好麻煩，要怎么辦？

小翌：Hieff Clone®系列克隆試劑盒的載體、片段連接陽性率可達95%以上，克隆數多，一次送樣檢測成功率極大提升！

圖1. 兩片段（3 kb）連接。結果顯示，10923ES菌落數多，陽性率100%。A：重組轉化平板。載體（11.6 kb）和插入片段（3 kb）摩爾比為1:2。B：插入片段PCR鑒定電泳圖，M：Yeasen 10505ES。

問：糟糕！我的實驗樣本太珍貴，是老師去野外采集時好不容易取回的，提取的DNA片段只有10 μL（5 ng），連接體系20 μL，至少需要添加60 ng才能連上載體，可是DNA片段還想保留一些，能減少片段投入量或者縮小連接體系嗎？

小翌：可以的，新款克隆試劑盒（Cat#10923ES）連接總體系可低6 μL，載體、片段投入量低，可以充分滿足您的需求，為您節省珍貴的樣本！

圖2. 在6 μL小體系非復蘇感受態下，連接10 ng低投入量單片段。結果顯示，10923ES性能好于競品，連接效率高，菌落數多，陽性率達100%。A-B：重組轉化平板。載體（10 kb）和插入片段（1 kb）摩爾比為1:2。C：插入片段PCR鑒定電泳圖，M：Yeasen 10505ES。

圖3. 10923ES超小體系連接三片段，連接效率，陽性率達100%。3 μL總體系連接，10923ES的投入量可低至2 μL。A&C&E：25 ng載體（11.6 kb）+各10 ng片段（1 kb+1.6 kb+1.8 kb）。B&D&F：插入片段PCR鑒定電泳圖。

圖4. 分別連接低濃度的五片段和六片段。結果顯示，10923ES在低濃度下連接性能穩定，菌落數多，陽性率100%。A-B：重組轉化平板。載體（11.6 kb）和插入片段（5片段共5.6 kb、六片段共7.6 kb）摩爾比為1:2。C-D：插入片段PCR鑒定電泳圖，M：Yeasen 10505ES，菌P長度2.6 kb。

問：我要構建一個新的載體，載體上需要含有6個外源基因片段，可是一次最多連上1-2個片段，每次都得重新設計同源臂、連接、轉化、挑菌、篩選，這一些系列操作至少要一周，就不能一次連上6個片段嗎？

小翌：收到！小翌最新研發的克隆試劑盒可以一次性連接6個片段到載體上，連接時間縮短至50 min，為您解決煩憂！

圖5. 六片段（7.6 kb）連接。結果顯示，10923ES產品性能好于競品，菌落數多，陽性率100%。A-B：重組轉化平板。載體（11.6 kb）和插入片段（7.6 kb）摩爾比為1:2。C：插入片段PCR鑒定電泳圖，M：Yeasen 10505ES，菌P長度2.6 kb。

圖6. 在37℃條件下放置7天，結果顯示，10923ES在低濃度下依舊穩定連接六片段。D-F：重組轉化平板。載體（11.6 kb）和插入片段（六片段共7.6 kb）摩爾比為1:2。H：插入片段PCR鑒定電泳圖，M：Yeasen 10505ES，菌P長度2.6 kb。

圖7. 10 μL小體系單片段連接和點突變克隆，10923ES陽性率達100%。A&C：重組轉化平板。B：插入片段PCR鑒定電泳圖，泳道1-5分別為菌落1，菌落2，陰性對照，陽性對照（基因組作為模版），陽性對照（PCR純化片段作為模版）。D：插入片段PCR鑒定電泳圖。

以上就是這么多年來，小翌接收到的真實反饋，面對用戶的各種問題，翌圣研發人員努力鉆研，通過內部的雙向分子酶理性設計與定向進化平臺，不斷設計、優化克隆試劑盒中的核心重組酶，并添加 的重組增強因子，抑制非同源末端連接，在保證克隆陽性率達到95%以上的同時，還能夠又快又好的完成實驗，助力發表高分文章。

在此基礎上，第三屆翌圣生物杯“克隆王”挑戰賽也即將拉開序幕，它不僅是對過往成果的一次集中展示，更是面向未來、促進技術交流與創新的嶄新起點。小翌誠邀每一位科研追夢人共同參與，通過克隆試劑盒，展現你們的克隆藝術，希望通過這場比賽，為大家搭建起一座溝通的橋梁，促進克隆技術的深度交流與智慧碰撞，攜手在這條基因奧秘的發現之旅上貢獻自身力量！

小翌溫馨提示：2024年5月9日前，掃描下方二維碼填寫報名信息，可獲得5分附加分，先報先得哦~

【克隆王挑戰賽預報名碼】

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