單克隆是指基因相同的細(xì)胞群，也意味著它們需要來源于同一個細(xì)胞。經(jīng)過工程改造的細(xì)胞群需要進(jìn)行單獨(dú)分析并分選，這一過程也被稱為單克隆分離，是確保遺傳同致性的基本步驟。單克隆分離也驗證了引入的基因改變和觀察到的表型之間的關(guān)系，并為后續(xù)步驟提供了可靠的基礎(chǔ)。

流式細(xì)胞分選(FACS)和有限稀釋法是兩種常用的單克隆分離技術(shù)。FACS是根據(jù)細(xì)胞的熒光特性分選細(xì)胞。一旦細(xì)胞被熒光標(biāo)記物標(biāo)記，將其引入到FACS儀器中，并根據(jù)特定的標(biāo)準(zhǔn)測量其熒光強(qiáng)度，從而決定是否分選細(xì)胞。值得注意的是，F(xiàn)ACS的分選過程是在高壓(30-70 psi)和高速流動下進(jìn)行的，可能會導(dǎo)致細(xì)胞損傷和應(yīng)激反應(yīng)，從而影響分選后細(xì)胞的存活率¹。另外，流動池和管路的尺寸較小，堵塞也是傳統(tǒng)FACS長期存在的一個問題。管路疏通會占用儀器大量的操作時間，推遲整體的實驗計劃。而且在非無菌環(huán)境中共用流體管路來操作，會大大增加污染的風(fēng)險。

有限稀釋法是一種更加溫和的技術(shù)，通過連續(xù)稀釋細(xì)胞懸液來降低細(xì)胞密度。雖然細(xì)胞不再受高壓力或依賴其熒光特性，但有限稀釋法是一個手動的勞動密集過程，極易出錯。而且有限稀釋法的單細(xì)胞沉降概率要遵循泊松分布，導(dǎo)致整體單細(xì)胞效率低且不可靠²。

Pala單細(xì)胞分離儀是專門應(yīng)對上述挑戰(zhàn)而設(shè)計的。結(jié)合微流控技術(shù)、流式細(xì)胞術(shù)和液滴分配技術(shù)，在＜2psi的低壓下對細(xì)胞進(jìn)行分選，可分別在1分鐘和6分鐘內(nèi)將細(xì)胞分選到96或384孔板中。在節(jié)省大量分選時間的同時獲得健康且有活力的細(xì)胞。

Pala單細(xì)胞分離儀保證了較高的單細(xì)胞效率，單細(xì)胞入孔率超過90%。自動化設(shè)計使得操作簡單直觀，不需要專門的操作人員和大量的應(yīng)用培訓(xùn)。小巧輕便的設(shè)計允許其可以在超凈臺內(nèi)完成操作，一次性細(xì)胞芯片避免了樣本間的交叉污染。

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