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CGCS 2024（第五屆）國際細胞與基因治療中國峰會暨展覽會于2024年5月22-24日在南京揚子江國際會議中心召開。翌圣生物研發科學家滕以剛博士受邀參加并在會議上進行了“翌圣生物新型PEI轉染試劑在AAV大規模生產中的應用”的主題報告：為我們介紹了翌圣生物自主研發的新型Ultra PEI-AAV轉染試劑，該產品專為懸浮體系中制備高滴度AAV而設計；翌圣生物的Ultra PEI-AAV轉染試劑以其產品性能和高轉染效率，AAV病毒滴度可提升2倍左右，有效降低了AAV制備成本。
截至目前，共有14種體外基因療法和29種體內基因療法通過FDA獲得批準。由于AAV具有低免疫原性、廣泛的趨向性和非整合性等特點，腺相關病毒（AAV）載體已成為臨床試驗和 FDA 批準申請[1]。
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Ultra PEI-AAV轉染試劑與PEI及其他競品相比，在懸浮293F細胞中分別生產AAV2/AAV5/AAV8/AAV9，可以大幅度提高AAV產量，且病毒產量顯著高于競品；針對不同血清型均有很高轉染效率。
在懸浮體系中進行AAV病毒載體的大規模生產時，轉染試劑和質粒的用量是影響生產成本的關鍵因素。Ultra PEI- AAV轉染試劑，當質粒和轉染試劑的使用量減少至一半，對病毒產量的影響較小，能夠有效控制并降低大規模生產的成本。
在大規模瞬時轉染中，轉染復合物比例過高會給生產帶來挑戰。翌圣生物的Ultra PEI-AAV轉染試劑經過工藝優化，成功將轉染復合物體積降至1%，極大地便利了大規模AAV病毒載體的生產。優化后的轉染復合物不僅易于制備，而且有效解決了傳統大規模生產中因體積限制而帶來的挑戰，為AAV病毒載體的商業化生產提供了強有力的支持。
在大規模瞬時轉染中，生產工藝往往要求在限定的時間內高效地制備大量的轉染復合物，并將這些復合物加入到懸浮培養的細胞中，以實現高效的細胞轉染。翌圣生物的Ultra PEI- AAV轉染試劑與質粒結合形成的轉染復合物，經過工藝優化后，能在6小時內保持高穩定性，同時不影響AAV病毒滴度，充分滿足了大規模AAV制備的工藝需求，保證了生產過程的高效性和連續性。
翌圣生物的Ultra PEI- AAV轉染試劑在與市場上的主流產品相比時，具有以下顯著優勢：
病毒滴度顯著提高：在病毒產量上實現了顯著提升，對于AAV2、AAV5、AAV8和AAV9等多種血清型，均能實現2倍左右的病毒滴度增長。
降低使用成本：該產品通過減少50%的DNA和轉染試劑用量，仍然保持高產量，有效降低了生產成本。
工藝放大更方便：轉染復合物的體積經過優化后可降至1%，并且具有長達6小時的穩定性，這些特性共同為大規模AAV病毒載體的制備提供了極大的便利和成本效益
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參考文獻
[1] Wang JH, Gessler DJ, Zhan W, Gallagher TL, Gao G. Adeno-associated virus as a delivery vector for gene therapy of human diseases. Signal Transduct Target Ther. 2024 Apr 3;9(1):78. doi: 10.1038/s41392-024-01780-w. PMID: 38565561; PMCID: PMC10987683.
[2] Srivastava, A., Mallela, K. M. G., Deorkar, N. & Brophy, G. Manufacturing challenges and rational formulation development for AAV Viral vectors. J. Pharm. Sci.110, 2609–2624 (2021).
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