1. 8周齡C57BL/6小鼠摘眼球放血。
2. 在75%的酒精中,浸泡5min。
3. 無菌狀態下取脾臟。
4. 取一干凈10cm大皿,放入無菌的70um濾網,將脾臟置于濾網上,加入2ml培養基。
5. 用研磨棒輕輕研磨臟器,將脾臟組織研磨成單細胞狀態,直到只剩下臟器的結締組織為止。
6. 研磨時動作應輕柔,用力過大可導致細胞死亡。
7. 棄去濾網和濾網上的結締組織,收集平皿內的細胞懸液,400g4min離心沉淀。
8. 用PBS重懸沉淀,就可以進行后續實驗。
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