一、實驗介紹

Cell Counting Kit-8（簡稱CCK-8）試劑可用于簡便而準確的細胞增殖和毒性分析。其基本原理為：該試劑中含有WST-8【化學名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽】，它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓（1-Methoxy PMS）的作用下被細胞中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲瓚產物（Formazan dye）。生成的甲瓚物的數量與活細胞的數量成正比。因此可利用這一特性直接進行細胞增殖和毒性分析。

二、實驗目的

　　1．藥物（也包括其他處理方式如放射線照射）對體外培養的細胞毒性的測定；

　　2．細胞增殖及細胞活性測定。

三、實驗步驟

四、送樣運輸要求：

1 凍存細胞

凍存管寄送前，使用封口膜把凍存管口封嚴密，凍存管單獨用自封袋存放。干冰運輸。運輸時間在2天以內干冰用量在10kg，在2-4天，干冰用量在20kg。

2 活細胞

1. 使用T25瓶，瓶蓋無孔。

2. 生長狀態良好的細胞，細胞密度在30%-40%為宜，寄送前，移去瓶內舊培養基，添加新培養基至瓶頸部，保留微量空氣，擰緊瓶蓋，并用封口膜密封，瓶身用75%表面消毒，把瓶用無菌袋或自封袋包裝，然后放置在適當的盒內，盒周圍用棉花等做防震防壓處理。當溫度低于10度是要加保溫措施，如暖寶寶等。

3. 細胞培養條件備注完整，如培養基，培養溫度，FBS用量等。

4. 備注：運送時間原則在4天以內，如細胞生長速度快，則加入的培養基血清可以減半，細胞密度在20%-30%。