最終分化的細胞可以通過譜系重編程產生,然而,譜系重編程受到原始細胞身份和部分功能殘留的轉化的阻礙。
2019年,發(fā)布在《Cell Resarch》上,標題為:“A two-step lineage reprogramming strategy to generate functionally competent human hepatocytes from fibroblasts”的文章,通過模擬自然再生途徑展示了一種新的重編程策略,該策略允許生成可擴展的肝祖細胞和具有功能能力的人肝細胞。
成纖維細胞被誘導為人肝祖細胞樣細胞(hhplc),該細胞能在體外穩(wěn)定擴增并在體內高效移植。此外,hhplc可以在體外有效地誘導成成熟的人肝細胞(hiHeps),其分子特征與原代人肝細胞(PHHs)高度相似。最重要的是,hiHeps可以大量生成,并且在功能上能夠取代PHHs進行藥物代謝估計、毒性預測和乙型肝炎病毒感染建模。該項研究結果強調了祖細胞階段對成功的譜系重編程的優(yōu)勢。這一策略有望通過譜系重編程產生其他成熟的人類細胞類型。
本實驗中,對人胚胎皮膚的處理,用鑷子將人胚胎皮膚組織切碎,在1 mg/mL膠原酶IV (Gibco)中37℃孵育1 - 2小時。酶處理后,離心收集細胞,用HEF培養(yǎng)基(含10%胎牛血清(FBS, Ausbian)、1%谷氨酰胺(Gibco)、1%非必需氨基酸(NEAA, Gibco)和1%青霉素/鏈霉素(PS, Gibco)的Dulbecco改良Eagle培養(yǎng)基(DMEM, Gibco)重懸。將細胞置于10 cm的組織培養(yǎng)皿中,用HEF培養(yǎng)基培養(yǎng)。
Ausbian進口胎牛血清,內毒素含量低,通過各種質量檢測與無菌檢測。新批次在試用前,提供試用服務,養(yǎng)細胞更放心。
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