抗體偶聯藥物（Antibody-drug conjugate, ADC），是將單克隆抗體藥物的高特異性和小分子細胞物的高活性相結合，用以提高腫瘤藥物的靶向性、減少毒副作用。ADC藥物通常由三部分組成：抗體（Antibody），有效載荷（Payload）和連接物（Linker）。

圖1.抗體偶聯藥物（Antibody-drug conjugate）結構【1】

有效載荷(Payload)發揮ADC的細胞內細胞毒活性，通過接頭部分與抗體共價結合的細胞毒性劑的性質非常重要，因為其作用機制將決定所得ADC作為抗癌化合物的效力及其可能的適應癥。理想的有效載荷具備以下特點：具有足夠高的細胞毒性；具有足夠低的免疫原性；具有高穩定性；具有可修改的功能組，而不會顯著影響其效力；具有旁觀者殺傷效應；具有適當的水溶性；靶點應為細胞內，因為大多數ADC需要進入腫瘤細胞才能釋放其有效載荷。

Payload分類

Payload可分為細胞毒類與非細胞毒類，絕大部分ADC都使用細胞毒類Payload。細胞毒類Payload有兩大代表，微管蛋白抑制劑和DNA抑制劑，其中DNA抑制劑又分為DNA損傷劑和拓撲異構酶抑制劑。微管蛋白抑制劑能夠干擾有絲分裂，腫瘤細胞分裂速度比大多數正常細胞更快，也使得微管蛋白抑制劑藥物對癌細胞殺傷更為有效。微管蛋白抑制劑可以分為兩種，一種可促進微管蛋白聚合，使微管生長不受調控，如海兔毒素類衍生物MMAE、MMAF；另一種能有效抑制微管組裝，誘導細胞的有絲分裂停止，如美登素類衍生物DM1、DM4。微管蛋白抑制劑是目前使用最為成熟的Payload，相比傳統的化療藥物的毒性強了許多，但也存在一些問題，比如微管蛋白抑制劑只能殺死處于細胞分裂期的腫瘤細胞，而對非分裂和靜態細胞的癌細胞無效，也較易產生耐藥性。能作用于整個細胞周期的DNA抑制劑，不僅對非分裂期的癌細胞有殺傷作用，還能殺傷對經典微管蛋白抑制劑耐藥的癌細胞。作為第三代Payload的DNA抑制劑可通過雙鏈斷鏈、烷基化、嵌合、交聯、抑制拓撲異構酶I（TOPO1）等方式破壞DNA結構與功能，促進癌細胞的死亡。

在獲批的14款ADC藥物種，Payload為海兔毒素類MMAE或MMAF的ADC藥物有6款，占到將近50%，在研的以MMAE為有效載荷的管線數也超過80個，海兔毒素類是目前的Payload。

表1.常用細胞毒類Payload分類

ADC既有大分子也有小分子，需要多種生物分析方法和平臺來分析ADC的多樣性。傳統的LC-MS/MS小分子分析方法通常用于分析未偶聯的有效載荷和DAR(Drug-to-antibody ratio, 表示每個抗體上所結合Payload分子的個數，是ADC的一個重要屬性。)隨時間的分布，而配體結合分析(LBA)和LC-MS/MS均可用于總抗體（TAb）和總ADC的分析。抗Payload抗體在ADC的免疫原性分析中起到重要作用。

SDS-PAGE

Anti-DXD mAb on SDS-PAGE under reduced condition. The purity is 98.2%；

Anti-DXD mAb on SDS-PAGE under non-reduced condition. The purity is 98.4%.

SEC-HPLC

The purity of Anti-DXD mAb is 99.0% as determined by SEC-HPLC.

ELISA Data

Dose response curve shows that the EC50 of  Anti-DXD mAb  is 41.42 ng/mL.

參考文獻：