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當?shù)鞍踪|的zui適穩(wěn)定量及標記的*pH值被確定以后，便可進行標記。具體步驟如下。
（1）根據標記所用膠體金的總量計算出所需要待標記蛋白質的總量。
（2）邊攪拌邊將蛋白質溶液加入膠體金溶液中，逐漸加入，lmg的蛋白質量大約需5min，或在攪拌下將膠體金逐漸加入到蛋白質溶液中，大約需5～10min。
（3）繼續(xù)攪拌10min，然后加入5％BSA使其終濃度為1％，或加入3％聚乙二醇（PEG，Mr：20000）使其終濃度為0．05％，其效果BSA要優(yōu)于PEG。
（4）將標記好的膠體金裝入透析袋中，兩頭扎緊，放人蔗糖或硅膠中濃縮，濃縮到原體積的1/10量，濃縮完畢后純化。如用離心純化方法時，不需要濃縮。
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