ALPCO活性GLP-1（7-36）酰胺化學(xué)發(fā)光ELISA用于定量測(cè)定人、小鼠和大鼠EDTA血漿中的活性胰高血糖素樣肽-1（GLP-1）（7-26）酰胺。僅供研究使用。不用于診斷程序。

艾美捷活性GLP-1(7-36)酰胺化學(xué)發(fā)光ELISA試劑盒（ALP-80-GLP1A-CH01）檢測(cè)原理：

ALPCO STELLUX™活性GLP-1 (7-36)酰胺化學(xué)發(fā)光酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）是一種夾心型測(cè)定法。96孔微孔板涂有針對(duì)活性GLP-1 (7-36)酰胺N端的單克隆抗體。標(biāo)準(zhǔn)品、對(duì)照品和樣本被加入到含有測(cè)定緩沖液的微孔板孔中。然后，微孔板在室溫下放置在微孔板振蕩器上，以700-900轉(zhuǎn)每分鐘的速度振蕩孵育。第一次孵育完成后，孔被洗滌緩沖液清洗并吸干。然后加入檢測(cè)抗體，微孔板再次在設(shè)定為700-900轉(zhuǎn)每分鐘的微孔板振蕩器上孵育。檢測(cè)抗體孵育后，板被洗滌，每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）結(jié)合的鏈霉親和素（SA）。板在室溫下在設(shè)定為700-900轉(zhuǎn)每分鐘的板振蕩器上孵育，洗滌并吸干。加入化學(xué)發(fā)光底物，微孔板在2分鐘后使用化學(xué)發(fā)光板讀取器讀取。產(chǎn)生的光強(qiáng)度與樣本中活性GLP-1 (7-36)酰胺的含量成正比。

供應(yīng)的材料：

Component Quantity Preparation

Active GLP-1 Microplate (96 wells) 12x8 strips Ready to use

"Standards (A-F,Zero)*

(500,120,30,10,4.0,1.5,and O pg/mL)" 1 vial each Lyophilized*

Control Levels 1,2 and 3* 1 vial each Lyophilized*

Assay Buffer 10mL Ready to use

DetectorAntibody 1 vial each Lyophilized*

Detector Antibody Buffer 14 mL Ready to use

Streptavidin-HRP 30μL 501X

Streptavidin-HRP Buffer 12 mL Ready to use

Wash Buffer Concentrate 100 mL 21X

Substrate A 6mL Ready to use

Substrate B 6 mL Ready to use

Plate Sealers 3 Ready to use

*請(qǐng)參閱每個(gè)試劑盒隨附的分析證書，了解批次特定信息、標(biāo)準(zhǔn)濃度、控制范圍和復(fù)溶量

所需材料：

用于分配高達(dá)1000 μL的精密移液管（帶一次性吸頭）

用于分配高達(dá)100 μL的可重復(fù)使用或多通道移液器

用于試劑準(zhǔn)備的量筒和移液管

用于試劑準(zhǔn)備的蒸餾水/去離子水

微孔板洗滌器或洗滌瓶

注意事項(xiàng)

1. 此試劑盒中包含的人血液制品已檢測(cè)HIV（人類免疫缺陷病毒）、HBV（乙型肝炎病毒）和HCV（丙型肝炎病毒）的存在。這些病毒的檢測(cè)方法不能保證病毒的W

全不存在；因此，所有試劑應(yīng)被視為潛在的傳染性物質(zhì)。處理和處置應(yīng)遵循所有適當(dāng)?shù)膰?guó)家和地方法規(guī)，以處理潛在的生物危害材料。

2. 所有來(lái)自動(dòng)物來(lái)源的材料均為牛海綿狀腦病（BSE）陰性。然而，所有材料應(yīng)被視為潛在的傳染性物質(zhì)。

3. 避免直接與皮膚接觸。

4. 本產(chǎn)品不可內(nèi)服。

5. 使用本產(chǎn)品時(shí)，避免進(jìn)食、飲水或吸煙。

6. 不要用嘴吸取任何試劑。

7. 此試劑盒中的試劑是特定批次的，不得替換。

8. 不要使用超過有效期的試劑。

9. 不建議更改測(cè)試程序，可能會(huì)影響測(cè)試結(jié)果。

活性GLP-1(7-36)酰胺化學(xué)發(fā)光ELISA試劑盒樣本處理：

人、小鼠和大鼠的EDTA血漿適用于此測(cè)定。應(yīng)使用BD™ P800血液收集和保存系統(tǒng)進(jìn)行樣本收集，該系統(tǒng)含有DPP-IV抑制劑和其他蛋白酶抑制劑混合物（產(chǎn)品編號(hào)366420）。或者，可以將全血收集到含有EDTA的冰鎮(zhèn)玻璃管中，預(yù)先根據(jù)制造商的說明加入適量的DPP-IV抑制劑（EMD Millipore Cat #DPP4）和抑蛋白酶。混合后將管子存放在冰浴中。立即以1,000 xg離心管子10分鐘，或?qū)⒐茏臃旁诒喜⒃谝恍r(shí)內(nèi)離心。如果樣本將在收集后2小時(shí)內(nèi)檢測(cè)，可以將樣本保存在冰上。對(duì)于更長(zhǎng)時(shí)間的儲(chǔ)存，應(yīng)將樣本分裝后存放在≤ -70°C。避免多次（>3次）凍融循環(huán)。樣本解凍后，在進(jìn)行測(cè)定前將樣本保持在冰上。建議在將樣本加載到板上之前，先將所有樣本在2 - 8°C下以3,000 xg離心10分鐘。含有生物素、溶血、黃疸或脂血的樣本在測(cè)定中未顯示出干擾。然而，建議避免使用明顯溶血或脂血的樣本。

典型標(biāo)準(zhǔn)曲線：

以下結(jié)果僅用于演示目的，不能代替通過測(cè)定獲得的數(shù)據(jù)。每次測(cè)定都必須運(yùn)行帶有對(duì)照的標(biāo)準(zhǔn)曲線。數(shù)據(jù)分析采用1/y2加權(quán)的A5參數(shù)曲線擬合。

文獻(xiàn)參考：

Finlay JWA, Dillard RF. Appropriate Calibration Curve Fitting in Ligand Binding Assays. AAPS Journal. 2007; 9(2): E260-E267.