甲狀旁腺激素（PTH，Parathyroid hormone, Parathormone, Parathyrin）最初在甲狀旁腺中以較大的分子前體形式——前前甲狀旁腺激素生物合成，由115個(gè)氨基酸組成。在細(xì)胞內(nèi)經(jīng)過(guò)順序性剪切掉25個(gè)氨基酸序列后，前前甲狀旁腺激素轉(zhuǎn)化為一個(gè)中間產(chǎn)物，即由90個(gè)氨基酸組成的多肽，前甲狀旁腺激素。通過(guò)額外的蛋白水解修飾，前甲狀旁腺激素隨后轉(zhuǎn)化為甲狀旁腺激素，這是一個(gè)由84個(gè)氨基酸組成的多肽。在健康個(gè)體中，甲狀旁腺激素的分泌通常通過(guò)血清鈣對(duì)甲狀旁腺的負(fù)反饋?zhàn)饔眠M(jìn)行調(diào)節(jié)。完整的PTH具有生物活性，并且在循環(huán)中非常迅速地清除，半衰期不到四分鐘。PTH在甲狀旁腺中發(fā)生蛋白水解，但主要在外圍發(fā)生，特別是在肝臟，也在腎臟和骨骼中，產(chǎn)生N-末端片段以及壽命更長(zhǎng)的C-末端和中間區(qū)域片段。在腎功能不全的個(gè)體中，C-末端和中間區(qū)域PTH檢測(cè)通常顯示PTH結(jié)果升高，這反映了腎臟清除能力受損。

完整PTH ELISA用于定量測(cè)定人血清中的完整PTH（甲狀旁腺激素）。該試驗(yàn)旨在用于美國(guó)的體外診斷。

艾美捷完整甲狀旁腺EIA(96孔)，IVD使用（ALP-21-IPTHU-E01）檢測(cè)原理：

完整PTH免疫測(cè)定是一種雙位點(diǎn)ELISA[酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定]，用于測(cè)量PTH的生物完整84個(gè)氨基酸鏈。通過(guò)親和層析純化了兩種不同的山羊多克隆抗人PTH抗體，使其對(duì)PTH分子上明確界定的區(qū)域具有特異性。生物素化的捕獲抗體僅結(jié)合中間區(qū)域和C末端PTH 39-84。辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體僅結(jié)合N端PTH 1-34。

完整的PTH 1-84通過(guò)與生物素標(biāo)記的捕獲抗體和HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體結(jié)合，形成檢測(cè)所需的夾心復(fù)合物。生物素標(biāo)記的抗體和包被鏈霉親和素的微孔板的容量都經(jīng)過(guò)調(diào)整，以顯示出即使在非常高的水平下，對(duì)非活性片段的干擾也是微不足道的。

在這個(gè)測(cè)定中，校準(zhǔn)品、對(duì)照品或患者樣本與酶標(biāo)記的抗體和生物素偶聯(lián)的抗體一起在包被鏈霉親和素的微孔板孔中同時(shí)孵育。在測(cè)定孵育結(jié)束時(shí)，微孔板被洗滌以去除未結(jié)合的成分。洗滌后，微孔板與底物四甲基聯(lián)苯胺（TMB）一起孵育。在HRP酶的存在下，TMB底物轉(zhuǎn)化為藍(lán)色。然后添加酸性停止溶液以停止反應(yīng)，并將顏色變?yōu)辄S色。黃色的強(qiáng)度與樣本中完整PTH的濃度直接成正比。使用從校準(zhǔn)品獲得的結(jié)果生成吸光度單位與濃度的劑量反應(yīng)曲線。對(duì)照品和患者樣本中存在的完整PTH的濃度直接從這個(gè)曲線上確定。

完整甲狀旁腺EIA(96孔)，IVD使用試劑盒組成：

樣本收集和儲(chǔ)存：

完整PTH的測(cè)定應(yīng)使用人類血清進(jìn)行。為了雙重測(cè)定樣本，需要50微升的血清。收集不含抗凝劑的全血。在血液凝固后，應(yīng)盡快分離出血清，最好在冷藏離心機(jī)中進(jìn)行，并盡快進(jìn)行測(cè)試。如果血清樣本不能立即進(jìn)行測(cè)試，應(yīng)儲(chǔ)存在-20°C或更低溫度下。在-20°C下冷凍的血清樣本可穩(wěn)定保存長(zhǎng)達(dá)4個(gè)月。

完整甲狀旁腺EIA(96孔)，IVD使用文獻(xiàn)參考：

1. Segre, G.V., Niall H.D., Habener J.F. et. al.: Metabolism of parathyroid hormone: physiological andclinical significance. Am. J. Med. 56: 774,1974.

2. Mallete, L.E., Gagel, R.F.: Parathyroid Hormone and Calcitonin. In: Murray J.F. (ed) Primer on theMetabolic Bone Diseases and Disorders of Mineral Metabolism. American Society for Bone andMineral Research, Kelseyville; William Byrd Press, Richmond, pp. 65-69, 1990.

3. Bilezikian, J.P.: Primary Hyperparathyroidism. In: Murray J.F. (ed) Primer on the Metabolic BoneDiseases and Disorders of Mineral Metabolism. American Society for Bone and Mineral Research,Kelseyville; William Byrd Press, Richmond, pp. 109-111, 1990.