細胞周期檢測
應用簡介
細胞周期分為間期與分裂期兩個階段。間期又分為三期:即DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)與DNA合成后期(G2期)。某些細胞在分裂結束后暫時離開細胞周期,停止細胞分裂,執行一定生物學功能(G0期)。由于細胞周期各時相的DNA含量不同,通常正常細胞的G1/ G0期具有二倍體細胞的DNA含量(2N),而G2/ M期具有四倍體細胞的DNA含量(4N),而S期的DNA含量介于二倍體和四倍體之間。
技術原理
PI可以與DNA結合,其熒光強度直接反映了細胞內DNA含量。因此,通過流式細胞儀PI染色法對細胞內DNA含量進行檢測時,可以將細胞周期各時相區分為G1/G0期,S期和G2/M期。
實驗方法

細胞周期檢測時,一定不要洗滌。不同于蛋白染料和細胞之間的牢固結合,DNA與染料的結合是一種結合態和游離態之間松散的平衡,不是很牢固,所以洗滌步驟會造成染料丟失,降低核酸的特異性熒光,造成測量值變小。
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