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細(xì)胞克隆實(shí)驗(yàn)科研實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)介紹
細(xì)胞克隆實(shí)驗(yàn)
應(yīng)用簡介
克隆形成及細(xì)胞克隆接種存活率，通過觀察單細(xì)胞集落形成情況，來計算克隆形成率，了解其增殖能力。
技術(shù)原理
單個細(xì)胞在體外持續(xù)增殖6代以上時細(xì)胞數(shù)量已達(dá)60個左右，此細(xì)胞群體成為克隆或集落，大小在1.0-2.0mm之間。集落形成率表示細(xì)胞的獨(dú)立生存能力，各種理化因素可能導(dǎo)致細(xì)胞的克隆形成能力發(fā)生改變，通過計數(shù)克隆形成率，可對單個細(xì)胞的增殖潛力做定量分析，了解細(xì)胞的增殖率和對生存環(huán)境的適應(yīng)性。軟瓊脂培養(yǎng)或平板克隆是zui常用的方法。
實(shí)驗(yàn)方法
1、試驗(yàn)成功的關(guān)鍵是細(xì)胞懸液的制備和接種密度。細(xì)胞一定要分散得好，不能有細(xì)胞團(tuán)，接種密度不能過大。
2、細(xì)胞在進(jìn)行克隆形成實(shí)驗(yàn)時要求有95%以上的分散度，否則結(jié)果的準(zhǔn)確度會受到很大影響。
3、克隆形成率公式：克隆形成率=（克隆數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)）×100%，細(xì)胞克隆形成率即細(xì)胞接種存活率，表示接種細(xì)胞后貼壁的細(xì)胞成活并形成克隆的數(shù)量。
4、一般初代培養(yǎng)細(xì)胞克隆形成率弱，傳代細(xì)胞系強(qiáng)；二倍體細(xì)胞克隆形成率弱，轉(zhuǎn)化細(xì)胞系強(qiáng)；正常細(xì)胞克隆形成率弱，腫瘤細(xì)胞強(qiáng)。
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