細胞克隆形成實驗

一、實驗介紹

　　細胞克隆形成率即細胞接種存活率，表示接種細胞后貼壁的細胞成活并形成克隆的數量。貼壁后的細胞不一定每個都能增殖和形成克隆，而形成克隆的細胞必為貼壁和有增殖活力的細胞。克隆形成率反映細胞群體依賴性和增殖能力兩個重要性狀。

二、實驗目的

　　1）通過對細胞處理后在細胞培養板上的克隆形成能力來提示處理后細胞的群體依耐性及增殖能力。

　　2）評價不同殺傷因素(藥物、基因等)對腫瘤細胞增殖能力或群體依賴性的敏感性;

　　3）評價細胞在體內成瘤性，癌細胞不一定都可以在體內成瘤，但若體外克隆能力越強，即表明體內成瘤性越強，算是一種模擬體內成瘤的體外實驗。

三、實驗步驟

四、實驗結果展示

五、送樣運輸要求：

1 凍存細胞

凍存管寄送前，使用封口膜把凍存管口封嚴密，凍存管單獨用自封袋存放。干冰運輸。運輸時間在2天以內干冰用量在10kg，在2-4天，干冰用量在20kg。

2 活細胞

1. 使用T25瓶，瓶蓋無孔。

2. 生長狀態良好的細胞，細胞密度在30%-40%為宜，寄送前，移去瓶內舊培養基，添加新培養基至瓶頸部，保留微量空氣，擰緊瓶蓋，并用封口膜密封，瓶身用75%表面消毒，把瓶用無菌袋或自封袋包裝，然后放置在適當的盒內，盒周圍用棉花等做防震防壓處理。當溫度低于10度是要加保溫措施，如暖寶寶等。

3. 細胞培養條件備注完整，如培養基，培養溫度，FBS用量等。

4. 備注：運送時間原則在4天以內，如細胞生長速度快，則加入的培養基血清可以減半，細胞密度在20%-30%。