手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關(guān)注視頻號
ID8是中性粒細(xì)胞的激活劑和趨化因子；本法通過檢測中性粒細(xì)胞的遷移距離來反映IL-8活性。
（1）配制2倍濃度的DMEM培養(yǎng)液100mL，其中含20mL的FCS，75mgNaHC03，置48C水浴預(yù)溫。
（2）配制2％瓊脂糖，水浴中保溫48℃左右時(shí)，與上述2XDMEM等量混勻。
（3）制片（3mlJ片），室溫凝固后，放4~C 30～60min進(jìn)一步凝固，打孔。
（4）分離人外周血中性粒細(xì)胞，用DMEM調(diào)整細(xì)胞濃度為2．5×105／mL，取lOgL細(xì)胞懸液加人各組中心孔，上孔分別加10／uL含趨化因子的待檢樣品及rlL-8或其他陽性對照趨化因子，下孔加lOgLDMEM作陰性對照。
（5）將玻片放濕盒中，37~C溫育2h后，甲醇固定30min，瑞氏染液染片并干燥。
（6）顯微鏡下分別測量細(xì)胞從中心孑L邊緣朝向樣品孔游走的距離（趨化游走距離）及朝向陰性對照孔的游走距離（自發(fā)游走距離），趨化活性以趨化指數(shù)表示。
為證實(shí)樣品中趨化效應(yīng)是IL-8特異的，還需將抗IL-8中和抗體先與待測樣品混合，孵育1h后，加入玻片孔中，觀察趨化反應(yīng)。亦可用其他相關(guān)抗體阻斷試驗(yàn)區(qū)別IL-8及其他趨化因子的作用。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對其真實(shí)性負(fù)責(zé)，不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí)，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
采購中心