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高效標記與細胞內分布Molday ION羅丹明B熒光標記物

來源:武漢艾美捷科技有限公司   2024年11月15日 16:41  

Benjamin Addicott等人發表于2010年的《Mesenchymal stem cell labeling and in vitro MR characterization at 1.5T of new SPIO contrast agent: Molday ION Rhodamine-B》,主要探討了新型超順磁性氧化鐵(SPIO)對比劑Molday ION Rhodamine-BMIRB)在標記間充質干細胞(MSC)方面的應用,并通過體外MRI實驗評估了其成像特性。


 

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方法

本研究采用了一種由Biopal公司研發的新型SPIO造影劑——Molday ION Rhodamine-BMIRB(BPL-CL-50Q01-6A-50BPL-CL-50Q02-6A-50),對間充質干細胞(MSC)進行了標記,并在1.5T臨床MRI設備上進行了體外成像特性研究。研究內容包括:

細胞培養:從食蟹猴(Macaca fascicularis)的髂嵴采集骨髓單核細胞,通過密度梯度離心法分離并擴增MSC

細胞標記:將MSC與不同濃度的MIRB共孵育20小時,濃度范圍從5100mg Fe/ml。通過普魯士藍染色和熒光顯微鏡觀察細胞內MIRB的分布,并通過流式細胞術檢測標記效率。

MSC功能評估:通過流式細胞術、基因表達分析、T細胞增殖抑制實驗以及成骨、成脂分化實驗,評估MIRB標記對MSC活力、增殖能力、表型及功能的影響。

MRI成像:構建含有MIRB標記MSC的瓊脂糖模型,使用T2加權梯度回波(GE)、T2加權快速自旋回波(FSE)和T2加權平衡穩態自由進動(bSSFP)序列進行MRI掃描,評估不同序列對MIRB標記MSC的檢測能力。

 

艾美捷Molday ION羅丹明B熒光標記物的d特優勢:

高效標記與細胞內分布:MIRB能夠被非吞噬性細胞高效內化,標記效率在MIRB濃度達到或超過20mg Fe/ml時接近95%MIRB主要定位于MSC細胞質的核周內體中,這種定位模式有助于MRI檢測時產生強烈的磁敏感效應。

對細胞功能無顯著影響:研究表明,在MIRB濃度高達30mg Fe/ml時,MSC的活力、增殖能力、表型以及成骨、成脂分化能力均未受到顯著影響。此外,MIRB標記的MSC在抑制T細胞增殖方面也表現出與未標記MSC相似的能力。

優異的MRI檢測性能:在體外MRI實驗中,使用長TR/TE、低帶寬和低翻轉角的梯度回波序列能夠最大限度地提高MIRB標記MSC的檢測靈敏度。研究發現在1.5T MRI設備上,MIRB標記的MSC在細胞數量低至約1000個時仍能被清晰檢測到,顯示出j高的檢測靈敏度。

多模態成像能力:MIRB不僅適用于MRI檢測,還因其共軛了羅丹明BRh-B)熒光染料而具備熒光顯微鏡檢測能力。這種多模態成像能力為科研人員提供了更多元的細胞追蹤手段。

 

MIRB在干細胞治療中的價值:

精準追蹤:MIRB的高標記效率和優異的MRI檢測性能使得科研人員能夠精準地追蹤移植后的干細胞,評估其在體內的分布、遷移及存活情況。

功能評估:通過MRI監測干細胞的功能變化,如分化狀態、增殖能力等,為干細胞治療的效果評估提供重要依據。

安全性:MIRB對干細胞功能無顯著影響,表明其在干細胞治療中具有良好的生物相容性和安全性。

 

結論

本研究證明了MIRB作為一種新型SPIO造影劑,在間充質干細胞標記及MRI檢測中的z越表現。MIRB不僅能夠高效標記干細胞且對細胞功能無顯著影響,還具備j高的MRI檢測靈敏度。這些特性使得MIRB成為干細胞治療中一種j具潛力的細胞追蹤工具。未來,隨著MIRB在更多臨床前和臨床試驗中的應用,其有望在干細胞治療領域發揮更大的作用,推動該領域的快速發展。

 

通過本文的研究,我們不僅展示了MIRBMSC標記和MRI檢測中的技術優勢,還進一步強調了Biopal品牌產品在干細胞追蹤領域的重要價值和廣闊應用前景。


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