盡管T7 RNAP在mRNA合成中發揮著重要作用，但實際操作中經常會產生double-stranded RNA（dsRNA）副產物。dsRNA是許多病毒的標志之一，因此它容易被細胞內的dsRNA結合蛋白識別，并觸發先天免疫反應和炎癥反應。這意味著，如果mRNA制劑中含有較高的dsRNA，可能會導致不必要的免疫激活，進而影響治療效果或引起副作用。過多的dsRNA也可能會干擾mRNA的正常功能，包括翻譯效率和mRNA的穩定性，間接影響mRNA治療的效果。

圖1.dsRNA副產物的影響與優化后的T7 RNAP反應[1]

因此，開發和采用有效的方法來減少dsRNA的生成是mRNA技術發展中至關重要的一部分。研究者們已經開發了多種策略，包括使用改良的T7 RNA 聚合酶，化學修飾核苷、調整 IVT 轉錄buffer，下游純化工藝等方法。翌圣生物利用其ZymeEditor定向進化平臺的能力，持續在進化mRNA體外合成的核心酶原料—T7 RNA聚合酶，開發出一款低dsRNA T7 RNA 聚合酶，抑制T7 RNA 聚合酶的RDRP活性，從根本上降低dsRNA的形成，從而可以大幅度降低dsRNA的含量。

• 產量：穩定在9mg/mL以上；

• dsRNA含量：dsRNA的含量顯著降低了至少10倍以上；

• 片段加帽率高：均超過99%。

翌圣公開的文章《FADS and semi-rational design modified T7 RNA polymerase reduced dsRNA production, with lower terminal transferase and RDRP activities》闡述了一項創新性研究。基于這項研究成果，翌圣已向中國、美國提交了申請。