多重PCR建庫技術(shù)一覽

多重PCR建庫技術(shù)在微生物檢測中的應(yīng)用

16S rRNA擴增子測序技術(shù)是微生物群落多樣性檢測常用的組學技術(shù)之一，該技術(shù)無需對微生物分離培養(yǎng)，直接提取樣本里面所有微生物的基因組，利用合適的通用引物擴增16S rDNA/18S rDNA /ITS等高變區(qū)或其他功能基因，采用高通量測序儀Miseq、Hiseq或Novaseq對其進行測序，通過生物信息學分析可以獲得特定實驗樣品中細菌、真菌或古菌等的物種組成、物種豐度、系統(tǒng)進化、群落比較等諸多信息。

多重PCR建庫技術(shù)在動植物檢測中的應(yīng)用

在傳統(tǒng)植物育種中，遺傳變異是通過視覺選擇進行鑒定。隨著分子生物學的發(fā)展，分子標記輔助育種解決了傳統(tǒng)利用表型篩選的作物育種方式成本高，周期長，費時費力的問題，逐步從“經(jīng)驗育種”走向“精確育種”?；诙嘀豍CR和基于目標區(qū)域基因組序列液相捕獲精準定位SNP/INDEL基因型分型測序技術(shù)，將位點選擇高靈活性、樣品數(shù)量靈活性、高通量、高靈敏度、低成本多項優(yōu)勢有效結(jié)合，實現(xiàn)對全基因組上特定基因位點變異的高通量靶向篩查。

多重PCR靶向捕獲測序可用于對植物種群中的遺傳多樣性進行分析。通過選擇性引物捕獲特定基因組區(qū)域并對多個樣本進行測序比較,可以研究不同品種或種群中的遺傳差異和多態(tài)性,為植物種質(zhì)資源的保護和利用提供重要的分子標記信息。

多重PCR技術(shù)可以針對多種植物病原真菌、細菌、病毒、線蟲等進行靶向檢測，對病害的流行預(yù)警、溯源和防控管理等具有重要作用。

多重PCR建庫技術(shù)在疾病研究及相關(guān)檢測中的應(yīng)用

臨床腫瘤基因檢測主要有家族遺傳性腫瘤檢測（檢測胚系基因突變）、腫瘤組織體細胞基因突變檢測（腫瘤分子分型、用藥指導(dǎo)等）、游離DNA基因突變檢測（腫瘤動態(tài)監(jiān)測，耐藥評估等），腫瘤樣本靶向NGS分析的建庫方法主要有兩種：雜交捕獲法和擴增法。泛生子一步法擴增建庫技術(shù)（中國發(fā)明ZL201710218529.4)，利用特定引物通過一步PCR擴增，結(jié)合生物信息算法分析，可檢測多種類型的變異信息，包括點突變、小片段插入/缺失、拷貝數(shù)變異、基因融合變異、甲基化修飾和RNA表達量變化等。除用于多種靶向藥基因突變進行同時鑒定以指導(dǎo)用藥之外，對于微量DNA信號的特異性放大能力在cfDNA檢測及血液腫瘤治療后微小殘留病（MRD）的鑒定等領(lǐng)域也具有極大的優(yōu)勢。