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丁基疏水色譜柱是一款以丁基鍵合無孔型親水性聚合物基質為填充劑的疏水作用色譜柱。其填料材料通常采用具有丁烷基疏水性質的有機硅，這種材料既具有良好的化學穩定性，又能有效地保持化合物分子的親疏水平衡。此外，也有以粒徑為2.5微米的丁基鍵合無孔型親水性聚合物基質為填充劑的疏水色譜柱，如TSKgel Butyl-NPR色譜柱。
丁基疏水色譜柱的分離機理與反相色譜基本相同，都是利用溶質與固定相間的疏水相互作用實現分離。不同的是，其固定相的疏水性不如反相固定相強，多為低密度分布的甲基、乙基、丙基、丁基和苯基等。在高濃度鹽溶液中，親水性較強的物質分子內部的疏水基團外露，可與疏水的固定相以疏水作用力相結合（吸附）。由于這種作用力大小不同，可以通過改變極性流動相的離子強度（由高到低）使其依次解吸附，從而實現分離。
丁基疏水色譜柱的應用范圍廣泛，主要包括以下幾個方面：
1、生物大分子分離分析
蛋白質：可用于蛋白質的分離純化，例如在生物制藥領域，對重組蛋白藥物（包括單抗）的非均一性分析中發揮重要作用。一些丁基疏水色譜柱能夠對離子交換色譜法無法分離的蛋白質結構異構體進行分離，還適用于在酸性條件下分離親水性的多肽。
酶：可以對酶等生物大分子進行分析和分離，幫助研究人員了解酶的性質、結構和功能，以及在不同條件下的行為變化。
核酸：對于核酸類生物大分子，丁基疏水色譜柱也有一定的分離能力，可輔助研究核酸的結構與功能。
2、有機化合物分離
脂溶性化合物：丁基疏水柱常用于高效液相色譜（HPLC）分離脂溶性化合物，如脂肪酸、磷脂等親脂性化合物的分離效果較好。
有機酸、有機堿：能夠分離多種有機酸、有機堿等化合物，在化學合成、藥物研發等領域有重要應用，可用于監測反應過程中有機化合物的純度和含量。
3、多糖分離
可以用于分離大大小小的多糖，在多糖的結構鑒定、性質研究以及相關藥物開發等方面具有應用價值。
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