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尺寸排阻色譜柱是一種基于分子尺寸差異進行分離的高效色譜柱。基于多孔性凝膠作為固定相，利用分子在凝膠孔道中的排阻效應進行分離。在色譜柱中，大分子不能滲透到凝膠孔穴中去而被排阻，較早地流出色譜柱；中等體積的分子部分滲透；小分子則能夠完q滲透入凝膠孔道內，最后流出色譜柱。因此，樣品分子基本按其分子大小先后流出，從而達到分離的目的。
尺寸排阻色譜柱的日常維護：
1、壓力管理
避免過高壓力沖擊：在使用過程中，要防止樣品中的顆粒雜質或聚集體進入色譜柱，造成堵塞，從而導致柱壓突然升高。樣品在進樣前必須經過適當的過濾和離心處理，例如使用0.45μm或更小孔徑的濾膜過濾，對于容易產生聚集體的樣品，可以采用高速離心的方法去除大顆粒雜質。
壓力監測：定期觀察色譜柱入口處的壓力，最好安裝壓力傳感器進行實時監測。如果發現壓力有逐漸升高的趨勢，可能是色譜柱部分堵塞或者填料有輕微變化的跡象。此時應盡快采取措施，如用合適的溶劑進行沖洗，以恢復壓力正常。
2、溫度控制
溫度穩定性：尺寸排阻色譜柱對溫度較為敏感，尤其是一些具有溫度敏感性的填料。在使用過程中，應確保色譜柱所處的環境溫度穩定，避免溫度波動過大。例如，將色譜柱安裝在帶有恒溫功能的色譜儀柱溫箱內，設置合適的溫度，并且保證柱溫箱的溫度精度在±0.5℃以內。
避免高溫損傷：在較高溫度下操作時，要按照色譜柱的使用說明書規定的最高溫度限制進行，防止填料的結構因高溫而遭到破壞。同時，在停止使用后，應讓色譜柱逐漸降溫至室溫，避免因快速降溫導致填料收縮不均勻，影響柱效。
3、流動相管理
溶劑純度與兼容性：使用的流動相溶劑必須是高純度的，并且要與色譜柱填料兼容。低純度的溶劑可能含有雜質，這些雜質會在色譜柱內積累，影響分離效果。例如，對于以水為流動相的系統，應使用超純水，并定期更換新鮮的溶劑。
溶劑過濾與脫氣：流動相溶劑在使用前要經過0.45μm或更小孔徑濾膜的過濾，以去除其中的顆粒雜質。同時，要對溶劑進行脫氣處理，因為溶劑中的氣泡會引起檢測器噪聲增加、保留時間重復性差等問題。常用的脫氣方法有超聲脫氣、氦氣鼓泡脫氣等。
流動相組成調整：避免頻繁地大幅度改變流動相的組成，因為這種變化可能會導致色譜柱填料的溶脹或收縮，影響柱效和分離效果。如果需要改變流動相組成，應采取漸進的方式，例如通過梯度洗脫程序緩慢地改變流動相的比例。
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