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革新 mRNA 應(yīng)用:T7 RNA 共轉(zhuǎn)錄試劑盒,開(kāi)啟高效、安全、便捷新篇

來(lái)源:翌圣生物科技(上海)股份有限公司   2025年06月30日 14:00  

mRNA(信使核糖核酸)作為攜帶遺傳信息、指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成的關(guān)鍵分子,在生命活動(dòng)中扮演著核心角色。在生物醫(yī)藥領(lǐng)域,科學(xué)家們巧妙利用 mRNA 的特性,通過(guò)人工合成特定序列的 mRNA,將其遞送至細(xì)胞內(nèi),指導(dǎo)細(xì)胞合成所需的蛋白質(zhì),從而實(shí)現(xiàn)疾病治療或預(yù)防的目的。在生物醫(yī)藥領(lǐng)域,mRNA 技術(shù) 態(tài)勢(shì)重塑著疾病治療與預(yù)防的格局,如今已在傳染病防治、腫瘤治療、罕見(jiàn)病干預(yù)等多個(gè)領(lǐng)域展現(xiàn)出令人矚目的成果,成為推動(dòng)生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)變革的重要力量。



mRNA藥物開(kāi)發(fā)的整個(gè)流程大致可以分為幾步:序列確定&設(shè)計(jì)—mRNA體外轉(zhuǎn)錄—包封制備,其中mRNA體外轉(zhuǎn)錄(In Vitro Transcription, IVT)步驟為: 質(zhì)粒DNA 提取&線性化—體外轉(zhuǎn)錄(共轉(zhuǎn)錄加帽)—純化—mRNA原液。化學(xué)共轉(zhuǎn)錄法加帽是目前mRNA藥物開(kāi)發(fā)的主流方法,通過(guò)一步法在IVT反應(yīng)中進(jìn)行加帽,能夠使得后續(xù)開(kāi)發(fā)過(guò)程的體外轉(zhuǎn)錄工藝放大變得尤為簡(jiǎn)單。


T7 RNA 共轉(zhuǎn)錄試劑盒通過(guò)對(duì)轉(zhuǎn)錄體系的深度優(yōu)化,以 low dsRNA T7 RNA 聚合酶為核心,能夠以含有 T7 啟動(dòng)子序列的線性雙鏈 DNA 為模板,以核苷酸(NTPs)為底物,高效轉(zhuǎn)錄合成 mRNA。其  設(shè)計(jì)和優(yōu)化的反應(yīng)體系,為 mRNA 的制備帶來(lái)了諸多優(yōu)勢(shì)。不僅顯著提升了 RNA 的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)量。在標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)條件下,投入 1μg 模板量,即可產(chǎn)生 150 - 200μg 的 RNA。同時(shí)dsRNA含量相比于野生型T7 RNA 聚合酶,降低至少10倍,一些項(xiàng)目當(dāng)中可達(dá)到上百倍的幅度。


圖1.mRNA藥物開(kāi)發(fā)及生產(chǎn)流程


共轉(zhuǎn)錄試劑盒優(yōu)勢(shì)


01


操作流程更簡(jiǎn)單

共轉(zhuǎn)錄加帽操作更簡(jiǎn)單,引入的物質(zhì)更少,工藝流程簡(jiǎn)單;

02


產(chǎn)量高

1 µg模板,可產(chǎn)生150-200 µg的Cap 1 mRNA;

03


免疫原性更低

試劑盒采用修飾的N1-Me-pUTP,low dsRNA T7 RNA聚合酶,可減少自身免疫反應(yīng);

04


加帽率高

加帽效率高達(dá)99%以上;

03


試劑盒組分全套

試劑盒組分豐富,包含有NTPs,T7酶mix,帽類(lèi)似物,DNase I 和LiCl等,滿足一步法共轉(zhuǎn)錄所需試劑需求。


驗(yàn)證數(shù)據(jù)

//


應(yīng)用范圍廣


針對(duì)于不同長(zhǎng)度的片段,20ul體系,1ug質(zhì)粒DNA投入,均可得到9mg/ml的產(chǎn)量,加帽率在100%。


表1.驗(yàn)證數(shù)據(jù)匯總


//


完整度高



//


dsRNA 含量極低


針對(duì)于8K序列驗(yàn)證數(shù)據(jù),dsRNA 含量相較與WT T7 RNA聚合酶,降低100倍,其他指標(biāo)未降低。



產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱(chēng)

產(chǎn)品貨號(hào)

產(chǎn)品規(guī)格

應(yīng)用

T7 High Yield RNA Synthesis Kit for Co-transcription(low dsRNA)

10634ES

10/50/100/500T

T7 RNA共轉(zhuǎn)錄試劑盒,T7組分為low dsRNA T7 RNAp

 


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產(chǎn)品名稱(chēng)

產(chǎn)品貨號(hào)

產(chǎn)品規(guī)格

應(yīng)用

T7 RNA共轉(zhuǎn)錄試劑盒

16222ES

10/50/100/500T

T7 RNA共轉(zhuǎn)錄試劑盒,T7組分為傳統(tǒng)型T7 RNAp

T7 High Yield RNA Synthesis Kit

10623ES

10/50/100/500T

體外轉(zhuǎn)錄試劑盒,T7組分為傳統(tǒng)型T7 RNAp

T7 High Yield RNA Synthesis Kit(low dsRNA)

10633ES

10/50/100/500T

體外轉(zhuǎn)錄試劑盒,T7組分為low dsRNA T7 RNAp



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