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AF555 鏈霉親和素,Alexa Fluor 555 streptavidin的組成

來源:西安瑞禧生物科技有限公司   2025年06月30日 14:02  

一、英文名稱與中文名稱

  • 英文名稱:Alexa Fluor 555 Streptavidin,AF555 Streptavidin

  • 中文名稱:Alexa Fluor 555標(biāo)記鏈霉親和素

二、物質(zhì)組成與結(jié)構(gòu)特點

Alexa Fluor 555鏈霉親和素是一種熒光標(biāo)記的生物結(jié)合蛋白復(fù)合物,由兩部分組成:

  1. Alexa Fluor 555染料:

    • 屬于Alexa Fluor系列熒光染料,發(fā)射波長約為565納米(綠光至黃光范圍),激發(fā)波長約555納米。

    • 染料分子通過化學(xué)交聯(lián)與鏈霉親和素共價結(jié)合,形成穩(wěn)定的熒光標(biāo)記復(fù)合物。

  2. 鏈霉親和素(Streptavidin):

    • 一種由鏈霉菌分泌的蛋白質(zhì),分子量約為53 kDa,由四個相同亞基組成,每個亞基可特異性結(jié)合一個生物素(Biotin)分子。

    • 其四級結(jié)構(gòu)賦予高穩(wěn)定性,且與生物素的親和力(解離常數(shù)Kd≈10?1? M),適用于高特異性結(jié)合實驗。

兩者的結(jié)合通過化學(xué)修飾實現(xiàn),確保染料不影響鏈霉親和素的結(jié)合活性,同時保持熒光信號的穩(wěn)定性。

三、功能特性

  1. 熒光標(biāo)記功能:

    • Alexa Fluor 555提供明亮的熒光信號,適用于顯微鏡成像、流式細(xì)胞術(shù)等需要光信號檢測的實驗。

    • 染料的光穩(wěn)定性較高,可耐受多次激發(fā),減少光漂白現(xiàn)象。

  2. 生物素結(jié)合能力:

    • 鏈霉親和素通過四個結(jié)合位點與生物素化分子(如抗體、核酸探針等)形成復(fù)合物,實現(xiàn)目標(biāo)分子的可視化或純化。

    • 結(jié)合反應(yīng)快速且特異性強(qiáng),通常在溫和條件下(如室溫、pH 7-8)即可完成。

四、應(yīng)用領(lǐng)域

  1. 免疫熒光標(biāo)記:

    • 用于標(biāo)記生物素化的二抗或核酸探針,在細(xì)胞或組織切片中定位特定抗原或核酸序列。

    • 例如,在熒光顯微鏡下觀察細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)分布時,AF555鏈霉親和素可結(jié)合生物素化的初級抗體,發(fā)出紅色熒光信號。

  2. 流式細(xì)胞術(shù):

    • 結(jié)合生物素化的抗體檢測細(xì)胞表面或胞內(nèi)標(biāo)志物,通過流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞亞群。

  3. 分子生物學(xué):

    • 在核酸雜交實驗中,標(biāo)記生物素化的探針,通過鏈霉親和素捕獲信號,用于基因表達(dá)分析或突變檢測。

五、注意事項

  1. 儲存條件:

    • 需避光保存于-20℃或更低溫度,避免反復(fù)凍融以維持染料穩(wěn)定性。

  2. 使用濃度:

    • 需根據(jù)實驗優(yōu)化濃度,過量標(biāo)記可能導(dǎo)致非特異性結(jié)合或背景信號增強(qiáng)。

  3. 兼容性:

    • 與多數(shù)組織固定劑和透化試劑兼容,但需測試具體實驗體系的穩(wěn)定性。

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    產(chǎn)地:西安瑞禧生物

    用途:科研

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