一、背景

沙氏葡萄糖瓊脂培養基又名SDA培養基或者沙氏培養基，英文名字是Sabouraud Dextrose Agar，是通用型的真菌培養基，屬于營養培養基中的一種，沙氏葡萄糖瓊脂培養基屬于一種改性的沙氏瓊脂，主要用來培養和區分真菌，并且這種培養基一般會和抗生素一起使用，通過使用沙氏葡萄糖瓊脂培養基可以將真菌和細菌材料中的病原體真菌分離出來。沙氏葡萄糖瓊脂培養基主要就是用來鑒別和培養真菌，尤其是那些皮膚真菌。有些也會用于醫藥工業潔凈區沉降菌和浮游菌中真菌的鑒定。

二、實驗原理

沙氏葡萄糖瓊脂培養基含糖量比較高，并且其PH值比較低，這種特性非常有利于真菌的生長，并且可以有效的抑制細菌的生長。真菌學蛋白胨提供氮源、硫源和礦物質及維生素。通過沙氏葡萄糖瓊脂培養基培養生長出的真菌可以保留其典型的形態學特征，也因此可以通過形態學特征的不同對菌種進行鑒定。

三、注意事項

因為培養時會產生大量的孢子，它們極易散播在空氣中，對于實驗室的環境造成污染，因此對于使用過后的培養基一定要很好的回收和看管，在丟棄之前一定要先放入121度的高溫中進行殺菌，經過1小時的高溫殺菌之后才可以丟棄。

四、應用

用于林生地霉培養基形態學觀察及生理學實驗研究：

通過對林生地霉血液分離株在五種不同培養基上的培養情況進行觀察,以便尋找出更適合其生長的培養基;另一方面,通過一些常規的生理學實驗,初步了解林生地霉的一些生理學特征,為實驗室的鑒定工作提供幫助,對臨床林生地霉感染的診斷具有重要意義。

方法：

1、五種培養基上的形態學觀察：（1）平皿培養的大體菌落觀察取林生地霉血液株置常溫下復蘇,3天后轉種于沙堡氏瓊脂培養基（SDA）、馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA）、麥芽汁瓊脂（MEA）、玉米粉瓊脂（CMA）和察氏瓊脂（CZA）平皿培養基上,分別置37℃和27℃溫箱培養2周,每日測量并記錄菌落直徑,觀察菌落形態,最后以生長時間和菌落平均直徑繪成生長曲線。

（2）平皿培養的光鏡下觀察每日分別挑取37℃和27℃的五種培養基的菌落標本置于載玻片上,經乳酸酚棉藍染色,光鏡下觀察。

（3）小培養（鋼圈法）將林生地霉血液株分別點種于以上五種培養基的小培養上,37℃和27℃溫箱培養,每天觀察菌絲生長、產孢情況,共2周。

2、生理學實驗：（1）芽管試驗挑取菌落置于0.5ml人血清中,置37℃溫箱孵育3h,觀察是否有芽管形成。

（2）厚膜孢子試驗將試驗菌株接種于玉米-吐溫80瓊脂培養基上,室溫孵育24-72小時,觀察厚膜孢子形成情況。

（3）硝酸鹽同化試驗將菌落配置成菌懸液,加入到無氮源培養基中,分別加少量硝酸鉀及蛋白胨于培養基表面。室溫培養,每日觀察。

（4）耐受試驗將菌落配置成菌懸液,分別接種于含有和不含的沙氏瓊脂培養基上。室溫培養3天,觀察結果。

（5）尿素酶試驗將菌落接種于尿素瓊脂培養基上,室溫培養1周,觀察培養基變色情況。

（6）糖發酵試驗將菌落接種于含有杜氏管的各種糖發酵培養基中,37℃孵育,每日觀察發酵情況。

（7）API 20C酵母系統利用API 20C AUX試劑盒檢測,判讀反應結果,將結果編號對照API 20C AUX編碼冊,待結果。

結果：

五種培養基上的形態學觀察：（1）平皿培養的大體菌落觀察1.1.1繪制的生長曲線在SDA、PDA和MEA三種培養基上,林生地霉于培養的第1周生長較快,其生長速度與時間呈正比;在兩種溫度下,27℃較37℃生長快。在CMA和CZA兩種培養基上生長速度始終較慢,27℃較37℃生長稍快。（2）菌落直徑同種培養基在不同溫度下其菌落直徑的比較結果顯示,于生長7天和14天時,各培養基在27℃的菌落直徑均比37℃菌落直徑大,有顯著性差異。

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