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賽默飛液相色譜儀作為分析化學領域的核心工具，憑借其高效分離能力和精準檢測性能，廣泛應用于藥物研發、環境監測及食品安全等領域。其核心原理基于混合物中各組分在固定相與流動相間的分配系數差異，通過高壓驅動流動相攜帶樣品流經色譜柱，實現組分的物理分離。檢測器將洗脫后的化合物轉化為電信號，最終生成以保留時間為橫軸、檢測器響應值為縱軸的色譜圖。
一、操作流程：標準化與精細化并重
1.流動相配制與脫氣
選用色譜純溶劑（如乙腈、甲醇）按比例混合，經0.45μm微孔濾膜過濾后，通過超聲脫氣10—20分鐘以消除氣泡。例如，含緩沖鹽的流動相需延長脫氣時間至5分鐘，避免泵送過程中產生氣泡干擾。
2.色譜柱平衡與樣品預處理
根據分析目標選擇C18、硅膠等填料類型的色譜柱，以1.0mL/min流速用流動相平衡30—60分鐘，期間監測基線穩定性。樣品需過濾去除顆粒物，酸性樣品可添加1%醋酸改善峰形，堿性樣品則加入10—20mmol/L三乙胺減少拖尾。
3.儀器初始化與參數設置
依次啟動泵、進樣器、柱溫箱及檢測器電源，通過Chromeleon CDS軟件設置流動相比例（如A:B=40:60）、流速（0.2—2.0mL/min）及檢測波長（如230nm）。對于梯度洗脫，需定義多階段溶劑比例變化程序。
4.進樣分析與數據采集
將標準品與樣品置于自動進樣器，啟動序列分析。系統自動完成進樣、分離及檢測，生成色譜圖后，利用軟件積分功能處理峰面積與保留時間數據。若出現拖尾峰，需調整流動相pH或更換色譜柱。
5.關機維護與色譜柱保護
分析結束后，先用甲醇-水（5:95）沖洗色譜柱30分鐘，再用100%甲醇沖洗30分鐘以去除殘留物。關閉軟件后，依次關閉各模塊電源，并填寫使用記錄。日常維護包括每日用稀硝酸清洗過濾器、定期反沖色譜柱（如異丙醇-二氯甲烷1:1混合液）以延長壽命。
二、技術優勢：創新驅動分析效能
賽默飛液相色譜儀通過集成四元高壓溶劑混合技術、智能流速控制及生物兼容性設計，實現從常規分析到高通量篩查的全場景覆蓋。例如，Vanquish Horizon UHPLC系統配備1.5μm實心核粒子色譜柱，結合雙模式恒溫控制，可在1200bar壓力下實現亞2分鐘級分離，顯著提升實驗室產出效率。其與Orbitrap質譜儀的聯用，更將檢測靈敏度提升至200fg級別，滿足復雜基質中痕量組分的精準定量需求。
從原理到操作，賽默飛液相色譜儀以科學嚴謹的設計與智能化軟件支持，為分析化學研究提供了可靠的技術保障。通過標準化流程與精細化維護，用戶可較大化發揮儀器性能，推動科研與產業應用的深度融合。
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