手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關(guān)注視頻號
?HCT-8人盲腸腺癌細(xì)胞實(shí)驗(yàn)操作步驟
HCT-8人盲腸腺癌細(xì)胞實(shí)驗(yàn)操作步驟
細(xì)胞傳代操作
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%-90%時(shí)即可進(jìn)行傳代。首先棄去舊培養(yǎng)基，用預(yù)熱的PBS輕柔洗滌2次。加入適量0.25%胰蛋白酶（含EDTA），室溫消化約1-2分鐘。在倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞變圓、間隙增大時(shí)，立即加入含血清的培養(yǎng)基終止消化。輕柔吹打細(xì)胞使其脫落，收集細(xì)胞懸液至離心管中，1000rpm離心5分鐘。棄上清，用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，按1:3至1:4比例接種于新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充適量培養(yǎng)基使總體積保持一致。
細(xì)胞凍存與復(fù)蘇
對于需要長期保存的細(xì)胞，建議在3-10代時(shí)進(jìn)行凍存。配制凍存液（含10%DMSO的培養(yǎng)基），將離心后的細(xì)胞沉淀用凍存液重懸至5×10^6/mL密度。分裝至凍存管中，采用梯度降溫法：4℃30分鐘→-20℃2小時(shí)→-80℃過夜，最后轉(zhuǎn)入液氮長期保存。復(fù)蘇時(shí)快速將凍存管置于37℃水浴中搖晃至融化，用預(yù)熱的培養(yǎng)基稀釋后離心去除DMSO，接種于培養(yǎng)瓶中。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對其真實(shí)性負(fù)責(zé)，不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí)，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
采購中心