培養基是是發酵過程或動植物細胞大量培養中供微生物或動、植物細胞的生長、繁殖或積累代謝產物,以合成生物化工產品所必需的營養基質。培養基的制備和使用是微生物實驗室檢測工作的重要環節。

1.1 購置

微生物檢驗用的各種藥品、試劑和干粉培養基必須是專業廠家生產的產品,質量必須符合有關的質量標準,并且生產商應提供培養基的名稱、產品編號、批號、各種成分和任何補充成分、培養基使用前的pH值貯存資料及有

效期等信息,以利于使用者對產品進行記錄和比較。應選擇產品市場信譽度高、有質量保證能力和服務保證能力的企業；企業是否通過了質量管理體系的認證是較為客觀的評價指標。

1.2 驗收

購買的培養基到貨后，應有專人做好接受和驗收工作，應仔細核對生產企業提供的資料、培養基名稱、規格數量、外觀特征、批號、保質期是否符合要求。每批培養基到貨物后都應對培養基的質量進行檢測，滿足檢測方法規定的要求后方可投入使用。

干粉培養基應保存在陰涼干燥處，要避免陽光直射；未開瓶的培養基保存期限應按照生產廠家提供的信息執行，開瓶后的干粉培養基易吸濕，應注意防潮并盡快用完。應定期對儲存中的培養基進行常規檢查，如容器密閉性復查、開封日期、內容物的感官檢查，如果培養基發生結塊、顏色異常和其他變質跡象就不能再使用。

3.1 培養基用水

培養基制備用水應使用電阻率不小于30萬Ωcm的蒸餾水或與其同質的水，最好不使用離子交換器生產的去離子水。

3.2 稱量

稱量時要用專用的角匙，避免交叉污染而影響檢驗結果；干粉培養基易吸潮，如有條件，盡量在濕度較低的房間稱取培養基。干粉培養基應嚴格按照生產商提供的有關說明準確配制。

3.3 復水

復水時不得用銅鍋或鐵鍋，以防有離子混入培養基中，影響微生物的生長；容器的大小需大于復水后培養基總體積的2倍以上，避免在加熱溶解過程中，培養基溢出；含有瓊脂粉的培養基，在加熱溶解之前可以浸泡數分鐘；加熱培養基時一定要進行攪拌，特別是瓊脂類培養基。為避免燒焦和沸騰溢出，對于少量的培養基最好使用沸水浴進行加熱。燒糊的培養基營養物質被破壞，并可產生有毒物質，如發現焦化，或未溶解均勻前培養基有溢出，該培養基即不能使用，應重新制備。對于瓊脂類培養基進行再融化時應使用沸水浴或流動蒸汽進行加熱,最多只能加熱兩次,第二次再融化后仍未用完的培養基應棄去。

3.4 滅菌

培養基應按培養基配方中 規定的條件及時進行滅菌，通常是121℃ 15 min，以保證滅菌效果和不損傷培養基的有效成份，含糖或特殊培養基，按照國家標準或生產商提供的說明滅菌。已配制好的培養基必須立即滅菌，避免微生物生長繁殖而消耗養分，改變培養基的酸堿度。高溫可破壞培養基的營養成分，還會使瓊脂的凝膠強度下降，因此必須嚴格控制滅菌溫度和時間，并且不可重復滅菌。高壓蒸汽滅菌鍋的壓力表等要定期進行檢定，并定期采用生物指示菌法或化學變色紙片對滅菌效果進行驗證。

3.5 pH測定

微生物必須在適宜的pH范圍內才能正常生長繁殖或體現其生物特性。滅菌前后PH會有所變化，所以滅菌前就要準備好，可以用1mol/L Na0H或 lmol/L HCL調整，注意不可反復調pH，否則會影響培養基的滲透壓。

3.6 配制好的培養基保存

滅菌以后培養基應該迅速冷卻至所需溫度，避免長時間保存在滅菌鍋內，造成過度滅菌，影響培養基的營養成分或選擇性效果。所以建議平板傾注后立即使用。保存時,盡可能貯存在不會改變其成分的條件下，即避光或在4 ℃ ~ 12℃冰箱密閉保存。如果保存時間超過2d,應將其放人密封的塑料袋中保存;配好的肉湯類培養基如果保存時間超過2個星期,應將其放在帶有螺旋蓋的試管或其他密閉的試管或容器中防止蒸發。