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公眾號：chem17
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一、流式抗體核心選擇原則（快準狠！）
1. 按樣本物種選克隆號
物種 | 推薦抗體來源 | 明星克隆號舉例 |
人 | 小鼠抗人 | CD3-UCHT1 |
小鼠 | 大鼠抗小鼠 | CD4-GK1.5 |
大鼠 | 小鼠抗大鼠 | CD45-OX1 |
> ? 避坑：勿用人源化抗體做小鼠實驗（交叉反應假陽性）
2. 按靶標表達量選熒光染料
3. 按激光器選染料組合
儀器配置 | 推薦方案 |
單激光（488nm） | FITC + PE + PerCP |
雙激光 | FITC + PE-Cy7 + APC |
四激光 | BV421 + PE + APC + Spark NIR780 |
二、流式抗體3步速選流程圖（收藏！）
三、流式抗體高頻問題解決方案
1. 信號弱/無信號
- 對策：
1. 檢查抗體有效期（≤1年）
2. 增加抗體濃度（常規(guī)1:100 → 1:50）
3. 改用高亮度染料（如FITC→PE）
2. 背景噪音高
- 對策：
1. 加Fc阻斷劑（BioLegend 422301）
2. 優(yōu)化破膜時間（胞內(nèi)染≤30min）
3. 設(shè)置FMO對照
3. 多色串擾嚴重
- 對策：
沖突組合 | 替代方案 |
FITC vs PE | 改用PerCP |
APC vs PE-Cy7 | 改用APC-Cy7 |
四、萬能多色方案模板
4色基礎(chǔ)版（適合凋亡/周期分析）
通道 | 靶標 |
FITC | Annexin V |
PE | CD4 |
PerCP | CD8 |
APC | PI/7-AAD |
8色免疫分型版（適合T/B/NK分析）
通道 | 靶標 |
BV421 | CD3 |
PE | CD4 |
APC | CD8 |
PE-Cy7 | CD19 |
APC-Cy7 | CD56 |
Spark NIR685 | CD16 |
FITC | CD45 |
PerCP | HLA-DR |
五、流式抗體品牌選購建議
需求 | 推薦品牌 | 明星產(chǎn)品線 |
高性價比 | BioLegend | PureBlk™ 阻斷劑 |
超高靈敏度 | BD Biosciences | Horizon™ 染料 |
稀有靶標 | Thermo Fisher | eBioscience™ |
BioLegend、BD Biosciences、Thermo Fisher代理——天津益元利康生物科技有限公司，提供各種蛋白、細胞、菌株、抗體、試劑盒、耗材等，歡迎咨詢選購。
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