G蛋白偶聯受體（GPCR）是人體內最大且最重要的藥物靶點家族（超過30%的上市藥物作用于GPCR）。當激動劑（比如激素、神經遞質或藥物）結合GPCR后，除了激活下游信號通路，受體內化（Internalization）作為藥物作用、療效差異和受體調控的核心環節，包含兩大關鍵途徑：β-arrestin依賴途徑（介導受體脫敏、信號轉導與內化）、β-arrestin非依賴途徑（如網格蛋白直接內吞、小窩蛋白途徑等）。精準檢測GPCR內化，是理解藥物-受體互作、預測療效差異、及開發更安全有效的下一代藥物的“動態觀測窗”。

圖1.GPCR信號傳導與內化[1]

傳統GPCR內化檢測是否令您感到“頭疼”

• 操作繁瑣耗時

• 通量太低

• 結果不穩定

• 數據量化難

瑞孚迪（Revvity）解決方案

pHSense™ pH敏感型Eu探針——革新！

告別復雜，擁抱高效

• 真正均相免洗：全程在培養板內操作，無需洗滌步驟

• 高靈敏&高通量

• 基于酶標儀檢測，無需特殊設備

• 靈活適配您的模型

技術原理：pH驅動的“信號開關”

1胞外狀態（中性pH）：pHSense™ Eu探針位于細胞外，熒光信號極低（靜默）。

2內化后（酸性內體/溶酶體）：探針隨GPCR進入酸性環境，觸發強烈、長壽命的Eu熒光信號。

操作極簡，典型操作僅需4步

以Anti-Flag為例：

1細胞鋪板過夜→棄上清

2加入pHSense™ Eu探針→孵育

3加入化合物（激動劑/拮抗劑）

4酶標儀讀數（可實時監測）

賦能您的創新研究

1高效藥物篩選：快速篩選靶向GPCR的先導化合物，評估其誘導/抑制內化能力

2實時動力學分析：動態監測內化速率、程度和時效，揭示藥物-受體作用過程。

3受體脫敏/耐受機制研究：探究長期藥物刺激下的受體調控機制。

實例驗證：清晰可靠的數據展現

圖2.使用pHSenseEu Anti-Flag檢測Exendin-4誘導的GLP1R-Flag（HEK293）內化

結果清晰顯示Exendin-4濃度依賴的內化響應，信號強度隨激動劑濃度升高而顯著增加。

圖3.使用pHSenseEu Anti-Flag檢測Exendin-4誘導的GLP1R-Flag（HEK293）實時內化檢測

注意：

為確保pHSense™探針（特別是Fab anti-Human IgG/ anti-mouse IgG2）不影響GPCR天然功能，建議在關鍵實驗中同步驗證GPCR信號通路（如cAMP-1/IP-1檢測）。

瑞孚迪：您的GPCR藥物研究伙伴！