一、產品信息

平臺編號：Bio-53914

規格：1×10?Cells/T25培養瓶

細胞信息：原代細胞

細胞名稱：小鼠星形膠質細胞

用途：研究

注意事項：僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產品信息以出庫為準）

二、細胞詳述

星形膠質細胞，是膠質細胞中體積的一種。從胞體發出許多長而分支的突起，伸展充填在神經細胞的胞體及其突起之間，起支持和分隔神經細胞的作用。

纖維性星形膠質細胞多分布在腦脊髓的皮質，突起細長，分支較少，胞質中含，多分布在灰質，細胞突起粗短，分支多。胞質內膠質絲較少，又稱苔狀細胞。電鏡下星形膠質細胞的胞核有缺失，胞質較清亮，游離核糖核蛋白體和粗面內質網均很少，糖原顆粒豐富，有大量的膠質絲。纖維形星形膠質細胞的突起呈長圓柱形，而原漿性星形膠質細胞的突起呈薄片狀，并常包裹著神經細胞及其突觸。星形膠質細胞的腳板與血管內皮細胞之間相隔一層基板，腳板質膜與基板接觸處有半橋粒結構。

三、細胞特性

1)組織來源于實驗動物的正常腦組織。

2)細胞鑒定：神經膠質纖維酸性蛋白(GFAP)免疫熒光染色法。

3)經鑒定細胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

5)細胞生長方式：星狀細胞，貼壁培養。

四、產品的運輸和保存

視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

2)T-25培養瓶充滿培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。

五、產品使用

1)本產品僅能用于科研

2)本產品未通過直接用于活體動物和人的審核

3)本產品未通過用于活體診斷的審核

六、接受后的處理方法

1)收到細胞后,請檢查是否漏液 ,如果漏液,請拍照片發給我們。

2)請先在顯微鏡下確認細胞生長 狀態,去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。

3)棄去T25瓶中的培養基,添加 6ml本公司附帶的培養基。

4)如果細胞密度達80%-90%請及時進行細胞傳代,傳代培養用6ml本公司附帶的培養基。

5)接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發現污染或疑似污染,請及時與我們取得聯系。

七、培養操作

1)復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入 4mL 培養基混合均勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。

1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2.加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消化。

3.按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4.將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存：待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類：

1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓脫落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。

2.4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加入血清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍存管做好標識。

3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

八、培養注意事項

1、收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象發生請及時和我們聯系。

2、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養條件一致。若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題,責任由客戶自行承擔。

3、用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養箱內靜置培養 4~6 小時,再取出觀察。此時多數細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常, 請將細胞離心后用新鮮培養基再次貼壁培養;如果染色結果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們聯系,信息確認后我們為您再免費寄送一次。

4、靜置細胞貼壁后,請將細胞瓶內的培養基倒出,留 6~8mL 維持細胞正常培養,待細胞匯合度 80%左右時正常傳代。

5、請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。培養瓶內多余的培養基可收集備用,細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養基混合,使細胞逐漸適應培養條件。

6、建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和我司技術部溝通交流。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7、該細胞僅供科研使用。

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