【參數(shù)信息】

英文名稱：iFluor 488 Phalloidin

中文名稱：iFluor 488 鬼筆環(huán)肽

分子量：～1900

激發(fā)波長(zhǎng)：493nm

發(fā)射波長(zhǎng)：517nm

溶解性： 溶于 DMSO

純度：≥95%

儲(chǔ)存條件：-20℃避光干燥

生產(chǎn)廠商：西安強(qiáng)化生物科技

【簡(jiǎn)單概述】

iFluor 488 Phalloidin 是一種熒光標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽（Phalloidin）衍生物，由以下兩部分構(gòu)成：

鬼筆環(huán)肽（Phalloidin）：

來源于劇毒蘑菇 鬼筆鵝膏（Amanita phalloides） 的環(huán)狀七肽毒素（bicyclicheptapeptide）。

分子量<2000 Da，尺寸約 12-15 ?，具有高度親脂性。

iFluor 488 熒光染料：

新一代綠色熒光染料，激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng) Ex/Em = 493/517 nm。

相比傳統(tǒng) FITC 染料，具有高亮度、強(qiáng)光穩(wěn)定性（光漂白速率僅為 FITC 的 1/3）及 pH不敏感性（pH 4-10） 。

核心功能：

特異性標(biāo)記細(xì)胞內(nèi)的 絲狀肌動(dòng)蛋白（F-actin） ，用于細(xì)胞骨架可視化，適用于組織切片、細(xì)胞培養(yǎng)物及無細(xì)胞體系。

【常見問題與解決方案】

1. 熒光淬滅

原因：光照、封片不當(dāng)。

預(yù)防措施：

全程避光操作。

使用抗淬滅封片劑（如SlowFade™ Gold、ProLong™）。

2. 多色成像串?dāng)_

問題：與發(fā)射光譜相近的染料（如Alexa Fluor 488）易交叉。

解決方案：

染料搭配：選擇發(fā)射波長(zhǎng)差異大的染料（如iFluor 488配iFluor 647）。

軟件校正：使用光譜拆分軟件減少串色。

3. 染色效果差異

細(xì)胞類型影響：

貼壁細(xì)胞（如HeLa）：標(biāo)準(zhǔn)流程即可。

懸浮細(xì)胞：需離心固定，增加通透步驟。

疑難樣本（如組織切片）：延長(zhǎng)染色至90分鐘，或提高通透劑濃度。

4. 背景信號(hào)高

可能原因：

固定不充分或通透過度。

工作液濃度過高或清洗不充分。

改進(jìn)方案：

優(yōu)化固定時(shí)間（10-30分鐘）。

染色后增加PBS清洗次數(shù)（3次×10分鐘）。

【相關(guān)試劑】

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