qPCR擴增曲線異常、復孔間差異巨大、標準曲線慘不忍睹……當qPCR結(jié)果反復異常,再三核對了反應(yīng)體系、儀器定期純熒光校準、操作步驟每一步都精準無誤——問題究竟藏在哪里?

PCR耗材看似平凡無奇:透明的管壁、整齊的孔位、不起眼的封板膜。然而,有時正是這看似普普通通的耗材,導致qPCR實驗翻車:
管壁厚度不均或材質(zhì)瑕疵:導熱效率波動,導致孔間溫度差異,Ct值飄忽不定; 密封性差:反應(yīng)體系在熱循環(huán)中蒸發(fā),體系成分濃縮,曲線形態(tài)異常,復孔間差異巨大; 熒光本底異常或透光性差:干擾信號采集,熒光值失真,標準曲線的線性度驟降;
那么,我們應(yīng)當如何防范這位“隱形刺客”呢?
答案是——選擇品質(zhì)更好的PCR耗材
高純度
BRAND普蘭德®德國原裝進口的PCR耗材在ISO-8級潔凈車間中生產(chǎn),無DNA、 DNase、RNase、熱原或PCR抑制劑。

更好的密封性
BRAND普蘭德®PCR板和封板膜組合具有更好的密封性,因此蒸發(fā)率低。即使是邊緣的PCR孔,也能夠保證在熱循環(huán)過程后有充足的反應(yīng)體積。

▲PCR反應(yīng)前后體積對比
左圖為一般的PCR板和封板膜
右圖為BRAND-PCR板和封板膜
更強的熒光信號
BRAND普蘭德®白色PCR耗材,能夠優(yōu)化qRCR的實驗結(jié)果,減少孔間信號交叉干擾,更大程度地反射熒光信號,即使是微弱的信號也能夠被探測到。

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