Hoechst33258染色液

產(chǎn)品貨號(hào)：R23441

產(chǎn)品規(guī)格：10ml/50ml

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

Hoechst 33258也稱bisBenzimide H 33258或HOE 33258，分子式為C25H24N6O ·3HCl，分子量為533.88，CAS Number 23491-45-4。Hoechst 33258是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料，對(duì)細(xì)胞的毒性較低，常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè)，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。Hoechst 33258也用于普通的細(xì)胞核染色、DNA染色。

Hoechst 33258的激發(fā)波長(zhǎng)為346nm，發(fā)射波長(zhǎng)為460nm，Hoechst 33258和雙鏈DNA結(jié)合后，激發(fā)波長(zhǎng)為352nm，發(fā)射波長(zhǎng)為461nm。尚寶生物 Hoechst 33258染色液可直接用于固定細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色，也可直接用于活細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色。

產(chǎn)品組成：

自備材料：

1. 熒光顯微鏡

2. 蒸餾水

3. 微量移液器

4. PBS或生理鹽水

操作步驟 (僅供參考) ：

（一）固定的組織細(xì)胞染色

1. 對(duì)于細(xì)胞或組織樣品，固定后沖洗去除固定劑。如果需要進(jìn)行免疫熒光染色，則行免疫熒光染色，染色完畢后再按后續(xù)步驟進(jìn)行 Hoechst 33258染色，如果不需要進(jìn)行其它染色，則直接進(jìn)行后續(xù)的Hoechst 33258染色。對(duì)于貼壁細(xì)胞或組織切片，加入少量Hoechst 33258染色液，覆蓋住樣品即可。對(duì)于懸浮細(xì)胞，至少加入待染色樣品3倍體積以上的Hoechst 33258染色液，充分混勻。

2. 室溫放置5～8min。

3. 輕輕吸除Hoechst 33258染色液。

4. 用無菌的 PBS 或生理鹽水清洗2～3次，每次3～5min。

5. 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。

（二）活細(xì)胞染色

1. 取96、24、6孔板培養(yǎng)細(xì)胞至合適狀態(tài)，按96孔板加入100μl、24孔板加入500μl、6孔板加入1ml的比例，加入適當(dāng)?shù)?/span>Hoechst 33258染色液，染液必須充分覆蓋細(xì)胞。

2. 在適宜于細(xì)胞培養(yǎng)的條件下培養(yǎng)20～30min。

3. 輕輕吸除Hoechst 33258染色液。

4. 用無菌的PBS或生理鹽水清洗2～3次，每次3～5min。

5. 進(jìn)行熒光檢測(cè)。

注意事項(xiàng)：

1. Hoechst 33258染色液的濃度適用于大多數(shù)常規(guī)染色的需要。

2. 熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡快檢測(cè)。活細(xì)胞或組織染色后宜立即觀察。

3. 為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。

4. 避免反復(fù)凍融，否則容易失效。

5. Hoechst 33258對(duì)人體有一定刺激性，請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。

6. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

有效期：6個(gè)月有效。