嗜肺軍團菌是一種有鞭毛,革蘭氏陰性,軍團菌屬多形態(tài)性的短小球桿菌。二名法 Legionella pneumophila Brenner DJ, Steigerwalt AG, McDade JE 1979
一、菌種簡介
1976年美國費城退伍軍人協(xié)會會員中曾爆發(fā)急性發(fā)熱性呼吸道疾病,經(jīng)研究,發(fā)現(xiàn)一種細菌命名為嗜肺軍團菌。隨后,許多有關細菌暫被列入這一屬,且追溯研究發(fā)現(xiàn)早在1943年即有軍團人員病的病例?,F(xiàn)已提出了超過30種軍團桿菌,至少19種是人類肺炎的病原。其中見病原體為嗜肺軍團菌(占病例的85%~90%),其次是L. micdadei(占5%~10%),再次是L. bozemanii和L. dumoffii。此類細菌形態(tài)相似,具有共同的生化特征,引起類似疾病。
冷卻水、冷凝水中嗜肺軍團菌特征描述
嗜肺軍團菌不抗酸,無孢子,無莢膜,類似于桿菌。不能分解明膠、糖類或是尿素,同時,不可參加酵解反應。嗜肺軍團菌無色,也非自身熒光。氧化酶與過氧化氫酶測試陽性。β-內(nèi)酰胺酶陽性。
專性需氧,在自然界可長期存活,如在蒸餾水中可存活139天,自來水中可存活369天,對熱和一般消毒劑敏感。菌落特征為灰白色,有光澤,濕潤,圓形,凸起,并有特殊臭味。革蘭氏染色不明顯,多用鍍銀法或Giemsa法染色。
二、細胞膜結構
嗜肺軍團菌,雖然是革蘭氏陰性的有機體,可是它巨大的感染力是來自于它的細胞外膜小葉上包含有脂多糖抗原。
血清不僅用于血液凝集的研究,還可用于直接觀察熒光標記過的組織抗體。患者體內(nèi)的特殊抗體可以被熒光抗體間接檢測。這項測試也已成功應用于酶聯(lián)免疫吸附法與微量凝集試驗。
三、發(fā)病機理
嗜肺軍團菌是一種細胞兼性寄生的細菌,可入侵變形蟲,或是人類的巨噬細胞內(nèi)。該菌的感染力在抗體和血清補體存在下大大提高(但并非需要兩者存在)。該菌會因噬菌作用被偽足包裹進入巨噬細胞,之后,菌體被細胞產(chǎn)生的自噬體包裹起來,這卻阻止了溶酶體的溶解。在這層保護之下,細菌大量繁殖。該菌利用一種型為IVB的分泌系統(tǒng)分泌的名為Dot/Icm(細胞器運行缺失/細胞內(nèi)繁殖)宿主入侵效應蛋白。這些效應器可以提升細菌在宿主細胞的存活力。該菌會在培養(yǎng)液里由II型分泌系統(tǒng)產(chǎn)生一種大小約為39kDa的金屬蛋白,這種蛋白對某些組織培養(yǎng)的細胞有毒害。II型分泌系統(tǒng)也是毒化作用的必需。
1976年,美國賓夕法尼亞州的費城舉辦了一次退伍軍人會議,參加者中超過200人發(fā)生肺炎,其中34人遇難。經(jīng)查明,這次事件的元兇是一種當時尚未發(fā)現(xiàn)的細菌——嗜肺軍團菌(該病也因此命名為軍團病)。這次事件反映了嗜肺軍團菌并非小面積的人與人的傳染。
四、基因組
2004年,三種類型的嗜肺軍團菌的基因序列已被成功測定,這為從分子生物學層次了解嗜肺軍團菌及軍團菌屬鋪平道路。對180種嗜肺軍團屬的DNA序列改變的基因比對檢測證實了其基因具有高塑性以及頻繁的突變頻率。更詳細的有關其生活周期的資料是來自于對生活在其自然宿主——卡氏棘阿米巴之中的嗜肺軍團菌的基因表達分布的研究。研究發(fā)現(xiàn)了嗜肺軍團菌的生活周期分為兩段,而且深入研究了其可感染、可復制的特性。
五、微生物檢查
1、一般取下呼吸道分泌物、肺活檢組織或胸前積液等標本進行細菌學檢查。
2、用BCYE培養(yǎng)基分離細菌,再根據(jù)肺炎特性、菌落特征、生化反應作出鑒定,但往往結果出現(xiàn)較晚。現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)嗜肺軍團菌有15個血清型。其中,嗜肺軍團菌血清1型(Lp1)與人類疾病關系最密切,其次為血清4型(Lp4)和6型(Lp6)。關于血清凝集法用的診斷血清方面,推薦天津生物芯片生產(chǎn)的嗜肺軍團菌全套診斷血清產(chǎn)品。
3、可將標本用一只熒光標記抗體進行直接熒光實驗,既特異又可做出快速診斷。
4、可用ELISA、RIA及乳膠凝集等試驗檢測標本中該菌特異性抗原或用PCR技術檢查該菌核酸進行快速診斷。核酸擴增技術,即聚合酶鏈式反應(polymerase chainreaction,PCR),其基本原理是設計、合成兩條寡核苷酸,作為引物,對應于待測病原微生物某一段特異性序列的兩端,然后在體外模擬DNA體內(nèi)復制的過程反復擴增,使靶序列放大上萬倍甚至上百萬倍而被檢測出來。
1)常規(guī)PCR:鑒定標準是通過電泳來判斷是否有擴增的核酸片段以及擴增產(chǎn)物的大小是否正確。
2)實時熒光PCR:通過對實時熒光PCR反應的每一個循環(huán)產(chǎn)物進行熒光信號的實時監(jiān)測來判斷分析。
六、防治原則
加強水資源管理及人工輸水管道和設施的消毒處理,防治軍團菌造成空氣和水源污染,是預防軍團菌病擴散的重要措施;治療紅霉素。
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