顯微鏡測微尺測定細胞大小的原理和步驟:
使用顯微鏡測微尺測定微生物細胞大小的原理
微生物細胞的大小是微生物分類鑒定的重要依據之一。微生物個體微小,必
須借助于顯微鏡才能觀察,要測量微生物細胞大小,也必須借助于特殊的測微計在顯微鏡下進行測量。
顯微測微計由鏡臺測微尺(stage micrometer)和目鏡測微尺(ocular micrometer)兩部分組成。
鏡臺測微尺是一塊中央有刻玻片(圖 2-7),刻度的總長爲 l mm,等分爲100 小格,每小格長 10 μm,
于對目鏡測微計進行標定的。目鏡測微尺可直接用于測量細胞大小,它是一塊圓形玻片(圖 2-8),其中央有等分到度,測
量時將其放在接目鏡中的隔板上。目鏡測微尺刻度的總長爲 l cm,等分爲 100 小格,每小格長 100 μm,
由于目鏡測微尺所測量的是微生物細胞經過顯微鏡放大之后所成像的大小,刻度實際代表的長度隨使用的目鏡和物鏡放大倍數及鏡筒的
長度而改變,所以,使用前須先用鏡臺測微計進行標定,求出某一放大率下,目鏡測微尺每一小格所代表的長度,然后用目鏡測微計直接測被測物件的大小。
一個目鏡測微尺刻度校正因子(calibration factor)的計算:一個目鏡測微尺刻度
(μ = 鏡臺測微尺上二重迭線間已知的距離 / 該二重迭線m)間目鏡測微尺的刻度
例 1: 假如二重迭線間已知的距離為 2 個鏡臺測微尺刻度(2 X 10 μ
m),對應 13個目鏡測微尺刻度,則
每一目鏡測微尺刻度的校正因子 = 20 μm / 13 = 1.54 μm
例 2: 假如以顯微鏡目鏡測微尺觀察某一微生物,長度為 5 個目鏡測微尺刻度,則
微生物長度 = 目鏡測微尺測量的刻度數 X 每一目鏡測微尺刻度的校正因子
= 5 X 1.54 μm = 7.70 μm
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