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1)緩沖溶液作用原理和pH值
當往某些溶液中加入一定量的酸和堿時，有阻礙溶液pH變化的作用，稱為緩沖作用，這樣的溶液叫做緩沖溶液。弱酸及其鹽的混合溶液(如HAc與NaAc)，弱堿及其鹽的混合溶液(如NH3·H2O與NH4Cl)等都是緩沖溶液。
由弱酸HA及其鹽NaA所組成的緩沖溶液對酸的緩沖作用，是由于溶液中存在足夠量的堿A-的緣故。當向這種溶液中加入一定量的強酸時，H 離子基本上被A-離子消耗：
所以溶液的pH值幾乎不變;當加入一定量強堿時，溶液中存在的弱酸HA消耗OH-離子而阻礙pH的變化。
2)緩沖溶液的緩沖能力
在緩沖溶液中加入少量強酸或強堿，其溶液pH值變化不大，但若加入酸，堿的量多時，緩沖溶液就失去了它的緩沖作用。這說明它的緩沖能力是有一定限度的。
緩沖溶液的緩沖能力與組成緩沖溶液的組分濃度有關。0.1mol·L-1HAc和0.1mol· L-1NaAc組成的緩沖溶液，比0.01mol·L-1HAc和0.01mol·L-1NaAc的緩沖溶液緩沖能力大。關于這一點通過計算便可證實。但緩沖溶液組分的濃度不能太大，否則，不能忽視離子間的作用。
組成緩沖溶液的兩組分的比值不為1∶1時，緩沖作用減小，緩沖能力降低，當c(鹽)/c(酸)為1∶1時△pHzui小，緩沖能力大。不論對于酸或堿都有較大的緩沖作用。緩沖溶液的pH值可用下式計算：
此時緩沖能力大。緩沖組分的比值離1∶1愈遠，緩沖能力愈小，甚至不能起緩沖作用。對于任何緩沖體系，存在有效緩沖范圍，這個范圍大致在pKaφ(或pKbφ)兩側各一個pH單位之內。
弱酸及其鹽(弱酸及其共軛堿)體系pH=pKaφ±1
弱堿及其鹽(弱堿及其共軛酸)體系pOH=pKbφ±1
例如HAc的pKaφ為4.76，所以用HAc和NaAc適宜于配制pH為3.76～5.76的緩沖溶液，在這個范圍內有較大的緩沖作用。配制pH=4.76的緩沖溶液時緩沖能力zui大，此時(c(HAc)/c(NaAc)=1。
3)緩沖溶液的配制和應用
為了配制一定pH的緩沖溶液，首先選定一個弱酸，它的pKaφ盡可能接近所需配制的緩沖溶液的pH值，然后計算酸與堿的濃度比，根據此濃度比便可配制所需緩沖溶液。
以上主要以弱酸及其鹽組成的緩沖溶液為例說明它的作用原理、pH計算和配制方法。對于弱堿及其鹽組成的緩沖溶液可采用相同的方法。
緩沖溶液在物質分離和成分分析等方面應用廣泛，如鑒定Mg2 離子時，可用下面的反應：
白色磷酸銨鎂沉淀溶于酸，故反應需在堿性溶液中進行，但堿性太強，可能生成白色Mg(OH)2沉淀，所以反應的pH值需控制在一定范圍內，因此利用NH3·H2O和NH4Cl組成的緩沖溶液，保持溶液的pH值條件下，進行上述反應。
4)緩沖液的測定
使用ph試紙或者酸堿檢測儀檢測。通過ph試紙上顯示的不同顏色與比色卡進行比對，從而得出酸堿值，但是ph試紙的測試的誤差較大，用酸堿檢測儀檢測，可直接得出酸堿值，測量值準確。
溶故配制注意事項
1.藥品要有較好的質皿試劑分為優級純(保證試劑，Guaranteed reagent,G.R.)，分析試劑(Antalytical reagent, A. R.)化學純(Chemical pure，C. P.)和實驗試劑(Laboratory reagent, L. R.)等等。化學試劑，雜質較多。只在個別情況下應用。如配洗液用的硫酸、配干操劑的氯化鈣等。
2.藥品稱且要。
3.配制試劑川水應用新鮮的去離子水或雙蒸餾水，比電閉值在50萬歐姆以上，PH在5.5-7.0之間才可應用，在組織培養等特殊用途時應注意此頂要求。配制一般化9k用溶液只要求用雙燕蒸餾水或去離子水.
4.配好后的溶液，應立即除菌處理(如高壓滅菌、抽濾或加抑菌物質),以防雜菌生長。
0.511x1/L pH9.57酸鹽緩沖液 NaHCO2 3.70g Na2CO3 0.60g 溶于600.00ml 蒸餾水中即得。不用時塞緊瓶塞.以免吸收空氣中二氧化碳使PH下降。小量配制。
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