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農藥殘留檢測方法

來源:上海標卓科學儀器有限公司   2014年08月13日 15:19  

1. 農殘試劑配置

緩沖溶液:取一包緩沖劑,加入500ml蒸餾水,溶解攪拌均勻,密閉、避光、陰涼處保存

顯色劑:取顯色劑一瓶,加入15ml緩沖溶液溶解,4℃冰箱中保存。

底物:取底物一瓶,加入15ml蒸餾水溶解,4℃冰箱中保存。

乙酰膽堿酯酶:取乙酰膽堿酯酶一瓶,用3ml緩沖溶液溶解, 4℃冰箱中保存。

注:因農殘試劑生產廠家眾多,使用時請以試劑說明書為準!

2. 樣品處理

選取有代表性的蔬菜樣品,擦掉樣品表面泥土,剪成1cm見方碎片,取樣品1g,放入燒杯或提取瓶中,加入5ml緩沖溶液,振蕩1min~2min,倒出提取液,靜置3min~5min,待用。

注意:樣品不可用水沖洗,擦去表面泥土等雜物后取樣。為了保證取樣具有代表性,葉菜一般取來自不同植株葉片的葉尖部樣本果菜從不同個體的表皮處取樣。

3. 對照溶液測試

在提取瓶中加入2.5ml緩沖溶液,再加入100ul酶液、100ul顯色劑,搖勻后于37℃放置15分鐘(每批樣品的控制時間必須一致)。15分鐘后再加入100μL底物搖勻,此時檢液開始顯色反應,應立即倒入1cm比色皿,放入儀器比色池中,將儀器調到測量界面,按操作指示面板按鍵區的“對照”按鈕,儀器開始做對照。3分鐘后儀器自動對照完成,對照完成后將對照樣取出,保持儀器界面不變。

注意:對照測試必須在*通道進行,對照測試△A應>0.3,若對照測試的結果小于以上數值時,儀器會自動提示“對照錯誤”,須重新做對照,以保證測量結果的準確性。(對照測試△A<0.3的原因:一是酶的活性不夠,二是反應溫度太低。)

4. 樣品溶液測試

另取干凈的提取瓶,放入2.5ml樣品提取液,加入100ul酶液、100ul顯色劑,搖勻后于37℃放置15分鐘(放置的時間與對照液放置的時間必須一致)。15分鐘后再加入100μL底物搖勻,此時檢液開始顯色反應,應立即倒入1cm比色皿,放入儀器比色池中,按操作指示面板按鍵區的“測量”按鈕開始測量,3分鐘后儀器測量完成,顯示測量結果。結果以酶被抑制的程度(抑制率)表示,當蔬菜樣品提取液對酶的抑制率≥50%時,表示蔬菜中有高劑量有機磷或氨基甲酸酯類農藥存在,樣品為陽性結果,陽性結果的樣品需要重復檢驗2次以上。

對陽性結果的樣品,可用其它方法進一步確定具體農藥品種和含量。

5. 說明

蔥、蒜、蘿卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中,含有對酶有影響的植物次生物質,容易產生假陽性。處理這類樣品時,可采取整株(體)蔬菜浸提。對一些含葉綠素較高的蔬菜,也可采取整株(體)蔬菜浸提的方法,減少色素的干擾。

甲醛檢測方法

1. 試劑配置

甲醛試劑(一)

甲醛試劑(二): 將甲醛試劑(二)加少量熱水溶解,再加入甲醛試劑(二),冷卻后定容于50ml容量瓶

注意:所有試劑均需避光、低溫(冰箱4℃)保存!甲醛試劑(一)有腐蝕性;配制好的甲醛試劑(二)可使用一個月。

2. 樣品處理

準確稱取0.2g樣品放入哈希管中,加入5滴甲醛試劑(一)和10ml蒸餾水,混勻后蓋緊瓶蓋,放入沸水中加熱5min,取出冷卻至室溫,用0.45μm微孔濾膜過濾,以除去懸浮顆粒,此為待測溶液。

3. 空白

取蒸餾水10ml于10ml比色管中,加入甲醛試劑(二)1 ml,混合均勻,放入恒溫水浴鍋中50℃加熱15分鐘,取出冷卻至室溫,移入1cm比色皿中,放入儀器相應比色池中,按操作指示面板區的“對照”鍵進行對照,對照完成后,儀器會自動記錄對照結果,并在顯示屏下方顯示為“對照測量完成”。

 

4. 測量

移取處理好的樣品溶液5ml于10ml比色管中,加入蒸餾水定容至10ml,然后再加入甲醛試劑(二)1 ml,混合均勻,放入恒溫水浴鍋中50℃加熱15分鐘,取出冷卻至室溫,移入1 cm比色皿中,放入已經做過對照的儀器通道中按操作提示面板區的“測量”鍵進行測量,測量完成后,儀器自動顯示樣品中甲醛濃度值X(mg/kg

吊白塊檢測方法

1. 試劑配置

吊白塊試劑(一)

吊白塊試劑(二):將吊白塊試劑(二)加少量熱水溶解,再加入吊白塊試劑(二),冷卻后定容于50ml容量瓶

注意:所有試劑均需避光、低溫(冰箱4℃)保存!吊白塊試劑(一)有腐蝕性;配制好的吊白塊試劑(二)可使用一個月。

2. 樣品處理

準確稱取0.2g樣品放入哈希管中,加入5滴吊白塊試劑(一)和10ml蒸餾水,混勻后蓋緊瓶蓋,放入沸水中加熱5min,取出冷卻至室溫,用0.45μm微孔濾膜過濾,以除去懸浮顆粒,此為待測溶液。

3. 空白

取10ml蒸餾水于10ml比色管中,加入吊白塊試劑(二)1 ml,混合均勻,放入恒溫水浴鍋中50℃加熱15分鐘,取出冷卻至室溫,移入1cm比色皿中,放入儀器相應比色池中,按操作指示面板區的“對照”鍵進行對照,對照完成后,儀器會自動記錄對照結果,并在顯示屏下方顯示為“對照測量完成”。

4. 測量

移取處理好的樣品溶液5ml于10ml比色管中,加入蒸餾水定容至10ml,然后再加入吊白塊試劑(二)1 ml,混勻后放入恒溫水浴鍋中50℃加熱15分鐘,取出冷卻至室溫,移入1 cm比色皿中,放入已經做過對照的儀器通道中按操作提示面板區的“測量”鍵進行測量,測量完成后,儀器自動顯示樣品中吊白塊濃度值X(mg/kg

雙氧水檢測方法

1. 試劑配置

     雙氧水試劑(一)

     雙氧水試劑(二)

注意:所有試劑均需避光、低溫(冰箱4℃)保存!雙氧水試劑(一)有腐蝕性,雙氧水試劑(二)有毒。

2. 樣品處理

準確稱取1.0g樣品放入哈希管中,加2ml雙氧水試劑(一)和6ml蒸餾水,混勻后蓋緊瓶蓋,放入恒溫水浴鍋50℃下加熱10min取出冷卻至室溫,用0.45μm 微孔濾膜過濾,濾液移入10ml比色管中,加0.2ml雙氧水試劑(二),再加蒸餾水至10ml刻度,此為待測溶液。

3. 空白

向比色管中加入2ml雙氧水試劑(一)和0.2ml雙氧水試劑(二),再加蒸餾水至10ml刻度,混勻,轉入1cm比色皿,放入儀器相應比色池中,按操作指示面板區的“對照”鍵進行對照,對照完成后,儀器會自動記錄對照結果,并在顯示屏下方顯示為“對照測量完成”。

4. 測量

 向待測液中加入2ml雙氧水試劑(一)和0.2ml雙氧水試劑(二),再加蒸餾水至10ml刻度,搖勻,轉入1cm比色皿中,放入儀器比色池中進行測量,測量完成后,儀器會自動顯示樣品濃度結果X(mg/kg

亞硝酸鹽檢測方法

1.試劑配置

亞硝酸鹽試劑(一):加少量熱蒸餾水溶解,冷卻后定容于50mL容量瓶。

亞硝酸鹽試劑(二):加蒸餾水溶解,定容于50mL容量瓶。

亞硝酸鹽試劑(三): 將兩種亞硝酸鹽試劑(三)溶于少量熱水中,冷卻后定容于50ml容量瓶。

亞硝酸鹽試劑(四):將亞硝酸鹽試劑(四)①加亞硝酸試劑(四)②定容于100mL棕色容量瓶,避光保存。

亞硝酸鹽試劑(五):加蒸餾水溶解,定容于100mL棕色容量瓶,避光保存。

注意:除試劑(一)需常溫保存外所有試劑均需避光、低溫(冰箱4℃)保存!亞硝酸鹽試劑(一)容易析出,請用50℃左右水浴加熱1分鐘后使用。配制好的亞硝酸鹽試劑(五)有腐蝕性,可放置一個月左右,溶液變綠后不能使用。

2.樣品處理

準確稱取0.1g經攪碎混勻的試樣,置于哈希管中,加入1mL亞硝酸鹽試劑(一)和5mL的蒸餾水,密閉后于沸水浴中加熱15min,取出后冷卻至室溫,然后一面轉動一面加入1mL亞硝酸鹽試劑(二),搖勻,再加入1mL亞硝酸鹽試劑(三),以沉淀蛋白質。加水至10ml刻度,搖勻,放置0.5小時,除去上層脂肪,余液用0.45μm微孔濾膜過濾,濾液備用。

3.對照測試

取5ml蒸餾水于10ml比色管中,加入0.1mL亞硝酸鹽試劑(四),混勻,放置5min后加入0.2ml試劑(五),混勻,靜置15分鐘,轉入1cm比色皿,放入儀器相應比色池中,按操作指示面板區的“對照”鍵進行對照,對照完成后,儀器會自動記錄對照結果,并在顯示屏下方顯示為“對照測量完成”。

4.樣品測定

取5ml待測溶液于10ml比色管中,加入0.1亞硝酸鹽試劑(四)混勻,放置5min后加入0.2ml試劑(五),混勻,靜置15分鐘,轉入1cm比色皿,放入已經做過對照的儀器通道中按操作提示面板區的“測量”鍵進行測量,測量完成后,儀器自動顯示樣品中亞硝酸鹽濃度值X(mg/kg

六價鉻檢測方法

1.試劑配置

    六價鉻試劑(一):加蒸餾水稀釋,定容于100mL容量瓶

    六價鉻試劑(二):加蒸餾水稀釋,定容于100mL容量瓶 

六價鉻試劑(三):加蒸餾水稀釋,定容于100mL容量瓶

六價鉻試劑(四):加蒸餾水稀釋,定容于100mL容量瓶

六價鉻試劑(五):將六價鉻試劑(五)①溶解于六價鉻試劑(五)②中,加水稀釋至100ml,儲存于棕色瓶中置冰箱內保存。

注意:所有試劑均需避光、低溫(冰箱4℃)保存!六價鉻試劑(一)、六價鉻試劑(二)、六價鉻試劑(三)、六價鉻試劑(四)有腐蝕性;當配制好的六價鉻試劑(五)溶液色變深后不能使用。

2.樣品處理

操作步驟

① 將待測的糧食、蔬菜、水果類樣品洗凈晾干,碾碎,混勻備用。禽蛋、水產等洗凈、晾干,取可食部分,混勻備用。

② 取經過預處理的均勻樣品1.000g于哈希管中(敞開),加入2.0mL試劑(一)純硝酸,4.0mL試劑(二)過氧化氫溶液,輕輕搖勻,放入亞臨界水萃取儀中,從溫度升到140℃時開始計時,保持恒溫lh,同時做試劑空白,取出哈希管待自然冷卻后,將消解液移入l0mL比色管中,將哈希管用水洗凈,合并洗液于比色管中,用水稀釋至10ml刻度,混勻、待測。

3.對照測試

取10ml蒸餾水于10ml比色管中,向比色管內加入0.1ml六價鉻試劑(三)和六價鉻試劑(四),混勻,再加入0.4ml試劑(五)搖勻,放置10min后,轉入1cm比色皿,放入儀器相應比色池中,按操作指示面板區的“對照”鍵進行對照,對照完成后,儀器會自動記錄對照結果,并在顯示屏下方顯示為“對照測量完成”。

4.樣品測定

取待測溶液,加蒸餾水稀釋至刻度,再向比色管內加入0.1ml六價鉻試劑(三)和六價鉻試劑(四),混勻,再加入0.4ml試劑(五)搖勻,放置10min后,轉入1cm比色皿,放入已經做過對照的儀器通道中按操作提示面板區的“測量”鍵進行測量,測量完成后,儀器自動顯示樣品中六價鉻濃度值X(mg/kg

重金屬檢測方法

1.試劑配置

    重金屬試劑(一)

    重金屬試劑(二)

重金屬試劑(三):加少量蒸餾水溶解,定容于100ml容量瓶

重金屬試劑(四):加少量蒸餾水溶解,定容于100ml容量瓶

注意:所有試劑均需避光、低溫(冰箱4℃)保存!重金屬試劑(一)、 重金屬試劑(二)有腐蝕性。

 

2.樣品處理

操作步驟

③ 將待測的糧食、蔬菜、水果類樣品洗凈晾干,碾碎,混勻備用。禽蛋、水產等洗凈、晾干,取可食部分,混勻備用。

④ 取經過預處理的均勻樣品1.0g于哈希管中,加入2mL重金屬試劑(一),2mL重金屬試劑(二),4ml蒸餾水,輕輕搖勻,蓋緊上蓋,放入超聲波提取儀中提取10分鐘,取出哈希管待自然冷卻后,打開上蓋,過濾將溶液移入10ml比色管中,加重金屬試劑(四)調節溶液PH=9,加水至刻度,此為待測溶液。

3.對照測試

取10ml蒸餾水于比色管內,加入1ml重金屬試劑(三),混勻,放置10min后,轉入1cm比色皿,放入儀器相應比色池中,按操作指示面板區的“對照”鍵進行對照,對照完成后,儀器會自動記錄對照結果,并在顯示屏下方顯示為“對照測量完成”。

4.樣品測定

取待測溶液,加蒸餾水稀釋至刻度,再向比色管內中加入1ml重金屬試劑(三),混勻,放置10min后,轉入1cm比色皿,放入已經做過對照的儀器通道中按操作提示面板區的“測量”鍵進行測量,測量完成后,儀器自動顯示樣品中重金屬濃度值X(mg/kg

二氧化硫檢測方法

1. 試劑配置

     二氧化硫試劑(一):加蒸餾水溶解,定容于500ml容量瓶

     二氧化硫試劑(二):加蒸餾水溶解,定容于50ml容量瓶

     二氧化硫試劑(三)

     二氧化硫試劑(四):加蒸餾水溶解,定容于50ml容量瓶

     二氧化硫試劑(五):將兩種二氧化硫試劑(五)混合,用熱水溶解,冷卻后定容于50ml容量瓶

     二氧化硫試劑(六):將二氧化硫試劑(六)溶解定容于50ml容量瓶中,取出20ml于100ml容量瓶中,滴加二氧化硫試劑(六)混勻使溶液由紅變黃,加水至刻度

     二氧化硫試劑(七):加蒸餾水溶解,定容于50ml容量瓶

     二氧化硫試劑(八)

注意:所有試劑均需避光、低溫(冰箱4℃)保存!二氧化硫試劑(一)有毒,二氧化硫試劑(七)、二氧化硫試劑(八)有腐蝕性。

2. 樣品處理

2.1  水溶性固體樣如白砂糖稱取1.0g,用少量水溶解,置于10ml比色管中,加入0.4ml二氧化硫試劑(七),5分鐘后加入0.4ml二氧化硫試劑(八),然后加入2ml二氧化硫試劑(一),加水至刻度,混勻,此為待測溶液。

2.2  其他固體樣如餅干、粉絲稱取1.0g研磨均勻的試樣,以少量水潤濕并移入10ml比色管中,加入2ml二氧化硫試劑(一),浸泡4小時以上,若上層溶液不澄清可加入二氧化硫試劑(四)及二氧化硫試劑(五)各0.25ml,混勻,過濾,加水至刻度,此為待測溶液。

2.3  液體試樣如葡萄酒可直接吸取1mL,置于10ml比色管中,用少量水稀釋,加入2ml二氧化硫試劑(一),搖勻,zui后加水至刻度,混勻,此為待測溶液。

3. 空白

取一支干凈的10mL比色管,準確加入二氧化硫試劑(一)10ml, 1ml二氧化硫試劑(二),1ml二氧化硫試劑(三)及1ml二氧化硫試劑(六),混勻,放置20分鐘后,轉入1cm比色皿,放入儀器相應比色池中,按操作指示面板區的“對照”鍵進行對照,對照完成后,儀器會自動記錄對照結果,并在顯示屏下方顯示為“對照測量完成”。

4. 測量

取待測溶液5ml于10mL比色管中,加入二氧化硫試劑(一)至10ml刻度,再加入1ml二氧化硫試劑(二),1ml二氧化硫試劑(三)及1ml二氧化硫試劑(六),混勻,放置20分鐘后,轉入1cm比色皿,放入已經做過對照的儀器通道中按操作提示面板區的“測量”鍵進行測量,測量完成后,儀器自動顯示樣品中二氧化硫濃度值X(mg/kg

備注:本儀器在室溫20°左右測量zui準確。

 


附錄1  常見故障及原因

如果操作不當,相應的會出現下列出錯提示信息。都可按

取消返回。

下表中若未說明生產問題的原因,則與錯誤提示信息相同。

 

錯誤提示信息

產生問題原因

對照測試錯誤

酶的活性不高;溫度太低

查詢單號輸入錯誤

查詢單號輸入的數據大于總數據量

 

附錄2  各物質*

檢測指標

品名

*mg/kg

農藥殘留

蔬菜、水果

≤50%

甲醛

水發產品

≤10

水產品

不得檢出

零食

不得添加

大麥粉

≤24

小麥粉

≤14

綠豆粉

≤2

棉白糖

≤7

白砂糖

≤4

紅糖

≤3

腐竹

≤6

粉絲

≤1

鱈魚肉

≤48

吊白塊

面粉、米粉、豆制品

不得檢出

雙氧水

水發品、肉制品、干果、椰果

不得檢出

亞硝酸鹽

食鹽、牛乳粉

≤2

鮮肉、鮮魚、糧食

≤3

蔬菜

≤4

鮮蛋類

≤5

香腸、臘腸、香肚、腌菜、火腿

≤20

肉制品、火腿腸、灌腸

≤30

肉罐頭

≤50

西式火腿、罐頭

≤70

六價鉻

糧食、蔬菜、水果、皮蛋、鹽蛋

不得檢出

重金屬

糧食、蔬菜、水果、皮蛋、鹽蛋

不得檢出

二氧化硫

銀耳、蓮子、龍眼、荔枝、蝦仁、米粉、豆芽、生姜

不得檢出

白糖

≤50

竹筍、蘑菇及罐頭

≤50

薯類淀粉

≤30

葡萄、黑加侖濃縮汁

≤50

果汁濃漿

≤15

食糖、餅干、粉絲

≤100

發酵酒、葡萄酒、果酒

≤50

嬰幼兒鐵強化糖果

≤50

蜜餞、果脯

≤500

 

 

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