利用多管發(fā)酵法使用生化培養(yǎng)箱培育物質在實驗之前必須要有所準備,比如采集樣品、調節(jié)溫度、水樣體積的計算等都要做出預計,以及培育過后的保存都要注意。多管發(fā)酵法所使用的培養(yǎng)液在分裝于各發(fā)酵管中后,應將發(fā)酵管盡快放于生化培養(yǎng)箱中,在115℃滅菌20min,這個溫度也應控制好,既達到滅菌的作用,還要防止培養(yǎng)物質分解流失,然后貯存于冰箱或暗處備用。
濾膜法所采用的M-FC培養(yǎng)基多使用外購的成品,培養(yǎng)基中苯胺藍的純度和質量往往影響菌落的顏色,因此,無菌包裝的成套培養(yǎng)基在使用前,先接種典型糞大腸菌,以觀察對比菌落的顏色,來鑒定其穩(wěn)定性。
生化培養(yǎng)箱多管發(fā)酵法的結果是根據不同接種量的發(fā)酵管所出現(xiàn)陽性結果的數目,從MPN表中查得相應的MPN指數,來計算每升水中糞大腸菌群細菌的MPN值。MPN是指zui大可能數,它是根據統(tǒng)計學理論,估計水體中的菌群密度和衛(wèi)生質量的一種方法,所以準確判斷不同接種量發(fā)酵管的陽性數是非常重要的,否則將導致較大偏差。濾膜法的結果是計數濾膜上呈藍或藍綠色的菌落,來計算出每升水樣中的糞大腸菌群數。所以為便于計數,減少誤差,理想的水樣體積是一片濾膜上生長20-60個糞大腸菌群菌落。
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