1、ELISA溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發（老辦法是放入濕盒內，紗布加點無菌水即可）。
2、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干（報紙就免了吧！）。
3、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存（洗液先用現配不費多少事的）。
4、底物是光敏感的，要在臨用前現配（同前，避光！）。
5、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。
6、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸（終止液為硫酸，小心毀容）。
7、待檢樣品要澄清，否則會影響結果。
8、溫浴時間應遵守試劑盒規定。
9、應盡量做雙孔實驗，這樣才能保證數據的準確性。
10、對結果有疑問的樣品要用其它方法進行確證。