上海雙贏生物實驗室細胞培養無菌操作步驟和注意事項：

1.打開無菌工作臺及凈化室的紫外燈，消毒半小時以上。

2.進入凈化室前先關閉紫外燈，打開超凈臺風機，等待30min以上，以排盡臭氧。

3.穿好隔離衣，戴好口罩，帽子。

4.風淋2分鐘。

5.0.1%過氧乙酸水泡手，擦干。

6.點燃酒精燈;超凈臺內應避免放入過多的物品;使用的吸管，滴管，試管，培養瓶等均事先滅菌。

7.打開各類瓶蓋前先過火，以固定灰塵;打開的瓶口、試管口過火焰，鑷子使用前應經火焰燒灼。

8.水平式風機的超凈臺，應使瓶口斜置，應盡量避免瓶口敞開直立。

9.同一根吸管或滴管不應連續用于幾個不同的細胞系;吸取培養基的吸管應離開培養瓶或試管口0.5cm，避免伸入培養瓶口或試管口;以防止細胞系的互相混雜污染。

10.漏在培養瓶上或臺上的液體，立即用酒精棉球擦凈。

11.操作完畢后恢復工作臺面。