ELISA試劑盒的實驗步驟
(1)使用前將所有試劑混勻,勿產生大量氣泡;
(2)取出所用板孔條數,剩余封口放回4℃保存;
(3)加入稀釋好的標準品100?l于反應孔內,加入待測樣品100?l于反應孔內,蓋上模板,震蕩混勻,37℃孵育2h;
(4)甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,震蕩30秒,甩去孔內液體,用吸水紙拍干,重復此操作5次;
(5)每孔加入100?l*抗體工作液,輕輕震蕩混勻,37℃孵育60分鐘;
(6)甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,震蕩30秒,甩去孔內液體,用吸水紙拍干,重復此操作5次;
(7)每孔酶標抗體工作液100?l, 輕輕震蕩混勻,37℃孵育30分鐘;
(8)甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,震蕩30秒,甩去孔內液體,用吸水紙拍干,重復此操作5次;
(9)每孔加入底物工作液100?l,震蕩混勻,37℃孵育15分鐘,避免光照;
(10)取出酶標板,迅速加入100?l終止液,立即測定結果;
(11)在450nm波長處測定各孔的OD值
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