(請嚴格遵照無菌操作)
1.吸出原培養瓶中的培養基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2~3
ml0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃?/SPAN>
1-2min)
2.鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消
化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6~8ml *培養基,輕輕吹打細胞
層,盡量把細胞層吹落,吹散
3.取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的*培
養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養
4.注意培養基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞
密度達到80%以后重復1項操作或者凍存
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