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熒光定量檢測試劑盒在特殊領域的應用推廣

來源:上海銘博生物科技有限公司   2015年11月23日 15:36  
     熒光定量檢測試劑盒在特殊領域的應用推廣
  熒光定量檢測試劑盒用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法。熒光定量檢測試劑盒應用親和素和生物素的ELISA試劑盒,親和素是一種糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,每個分子由4個亞基組成,可以和4個生物素分子親密結合。現在使用更多的是從鏈霉菌中提取的熒光定量檢測試劑盒。生物素又稱維生素H,分子量244.31,存在于蛋黃中。用化學方法制成的衍生物,熒光定量檢測試劑盒可與蛋白質、糖類和酶等多種類型的大小分子形成生物素醫學教育網整理化的產物。
     熒光定量檢測試劑盒報價也是相當的低。用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。熒光定量檢測試劑盒在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每 次3分鐘。加樣:往熒光定量檢測試劑盒加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育1小時。然 后洗滌。加酶標抗體:熒光定量檢測試劑盒于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37 ℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。結果判定:可于白色背景上,熒光定量檢測試劑盒可直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強 ,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在 ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大 于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
     以上特性來看,針對購買熒光定量檢測試劑盒報價合情合理,親和素與生物素的結合,雖不屬免疫反應,但特異性強,親和力大,兩者一經結合就極為穩定。由于1個親和素分子有4個 生物素分子的結合位置,可以連接更多的生物素化的分子,形成一種類似晶格的復合體。熒光定量檢測試劑盒具有性、靈敏性、特異性、重復性和可靠性等特點,主要用于科研和定量檢測細胞液、體液 、組織、血清、血漿等標本中豬內皮素1(ET-1)含量。用于傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤 標志物和特種蛋白等的檢測的血清標本的收集則沒有時間和體位方面的影響。熒光定量檢測試劑盒的細胞培養上清:熒光定量檢測試劑盒檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左 右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸 液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,熒光定量檢測試劑盒以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘 左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
 

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