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食品中人工合成著色劑的測定解決方案
合成著色劑因其色彩亮麗、性質穩定、價格低廉，成為食品工業常用的添加劑之一。它們通常是以苯、甲苯、萘等化工原料合成，長期食用對人體健康具有一定的毒性，尤其是對少年兒童。世界各國對合成著色劑的使用范圍和*都有嚴格的規定，《GB 2760-2014 食品安全國家標準 食品添加劑使用標準》中準許使用的人工合成色素也有嚴格規定。我國也有很多檢測著色劑的相關標準，采用不同的凈化方法，包括C18柱凈化、聚酰胺粉凈化等，C18凈化方法僅僅適用于水果罐頭，而聚酰胺粉凈化方法過程比較繁瑣。
方法優勢：
對比國標方法本方案具有：
前處理步驟簡單、回收率高、方法穩定性好、凈化效果優異等特點；
采用了迪馬科技的ProElut PWA-2，可以保證實驗結果的重現性和準確性；
過柱方法簡單易操作，對操作人員要求不高，檢測成本相對較低，能被很多企事業單位采用；
可同時檢測8種人工合成著色劑，檢出限：亮藍為1.0 mg/kg，其他均為0.2 mg/kg，符合國家標準要求。
柱優勢
ProElut PWA-2吸附劑采用弱陰離子交換機理去除雜質，同時對著色劑沒有不可逆的吸附，保證了樣品的凈化效果及回收率；本產品是商品化的成品柱，吸附劑穩定性好，不受外界環境因素影響，保證實驗結果的重現性和準確性；過柱過程操作步驟簡單，節省時間，提高了工作效率。
以下為詳細解決方案，敬請參考！
食品中人工合成著色劑的測定
1、適用范圍
本方案適用于糕點、果醬、水果罐頭、黑芝麻糊、果凍、冰淇淋、乳飲料、糖果和紅酒中人工合成著色劑的檢測；檢出限：亮藍為1.0 mg/kg，其余均為0.2 mg/kg；
2、提取
2.1 糕點、果醬
取1.0 g樣品，加入20 mL提取液A*，振蕩2 min，40 ℃水浴超聲提取10 min，6000 rpm下離心2 min，收集上清液；
取下層殘留物，加入10 mL提取液A*，振蕩2 min，40 ℃水浴超聲提取15 min，6000 rpm下離心2 min，收集上清液；
將下層殘留物用10 mL提取液A* 按照步驟(2)重復提取一次，合并三次上清液；
將上清液在40 ℃水浴條件下，減壓蒸至約15 mL，再加入3 mL甲酸混勻，待凈化。
2.2 水果罐頭、黑芝麻糊
取1.0 g樣品，加入20 mL提取液A*，振蕩2 min，40 ℃水浴超聲提取10 min，6000 rpm下離心2 min，收集上清液；
取下層殘留物，加入10 mL提取液A*，振蕩2 min，40 ℃水浴超聲提取15 min，6000 rpm下離心2 min，合并兩次上清液；
將上清液在40℃水浴條件下，減壓蒸至約15 mL，再加入3 mL甲酸混勻，待凈化。
2.3 冰淇淋
取1.0 g樣品，加入20 mL提取液A*，振蕩2 min，40 ℃水浴超聲提取10 min，6000 rpm下離心2 min，收集上清液；
將上清液在40 ℃水浴條件下，減壓蒸至約15 mL，再加入3 mL甲酸混勻，待凈化。
2.4 果凍
取1.0 g樣品，加入10 mL水，40 ℃水浴超聲提取15 min，加入5 mL甲醇和3 mL甲酸混勻，待凈化。
2.5 乳飲料、糖果
取1.0 g樣品，加入10 mL水、5 mL甲醇和3 mL甲酸混勻，待凈化。
2.6 紅酒
取1.0 mL樣品，加入0.5 mL甲醇和0.3 mL甲酸混勻，待凈化。
*提取液A：取100 mL乙醇和50 mL乙腈，混勻，取140 mL乙醇：乙腈（2：1）混合溶液，加入60 mL水和2 mL氨水，混勻。
3、凈化——ProElut PWA-2 150 mg/6 mL（Cat.# 65815）
a活 化： | 依次用5 mL甲醇、5 mL10%甲酸水活化； |
b上 樣： | 加入待凈化液，棄去流出液； |
c淋 洗： | 加入5 mL甲醇，棄去流出液； |
d洗 脫： | 加入5 mL 15%氨水甲醇溶液，收集流出液； |
e重新溶解： | 將洗脫液在50 ℃下氮吹至約300 μL，用流動相定容至1 mL，供HPLC分析。 |
4、色譜條件
色譜柱：Inspire C18，250 × 4.6 mm，5 μm（Cat.# 81006）
流 速：1.0 mL/min
進樣量：20 μL
柱 溫：35 ℃
檢測器：PDA 254 nm
流動相：A：乙腈 B：0.02 mol/L 乙酸銨溶液
梯度設置
時間（min） | 0 | 20 | 30 | 31 | 40 |
A（%） | 5 | 30 | 37 | 5 | 5 |
B（%） | 95 | 70 | 63 | 95 | 95 |
5、添加回收結果
檸檬黃 | 新紅 | 莧菜紅 | 靚藍 | 日落黃 | 誘惑紅 | 亮蘭 | 赤蘚紅 | |
糕點 | 97.45 | 95.47 | 92.80 | 92.70 | 97.69 | 99.77 | 87.80 | 91.38 |
果醬 | 96.79 | 95.31 | 94.21 | 94.07 | 95.23 | 98.36 | 93.91 | 92.55 |
果凍 | 107.12 | 101.29 | 103.29 | 96.04 | 103.18 | 103.96 | 100.36 | 93.87 |
冰淇淋 | 99.55 | 97.66 | 106.98 | 93.44 | 101.45 | 102.22 | 100.16 | 97.13 |
乳飲料 | 100.37 | 96.55 | 83.23 | 96.26 | 99.70 | 101.48 | 102.00 | 94.35 |
糖果 | 98.41 | 98.61 | 95.47 | 94.83 | 99.93 | 99.02 | 95.28 | 94.26 |
水果罐頭 | 97.64 | 100.40 | 98.66 | 94.47 | 99.51 | 100.09 | 100.77 | 99.21 |
黑芝麻糊 | 101.51 | 105.56 | 92.76 | 96.07 | 106.67 | 103.43 | 114.44 | 99.55 |
紅酒 | 97.34 | 96.19 | 97.63 | 88.29 | 97.82 | 96.64 | 96.87 | 96.17 |
食品中人工合成著色劑的HPLC檢測（添加水平10 mg / kg）的添加回收結果
人工合成著色劑標準(10 mg/L)液相色譜圖
添加水平為10 mg/kg糕點中人工合成著色劑檢測的液相色譜圖
糕點中人工合成著色劑檢測(空白樣品)的液相色譜圖
添加水平為10 mg/kg果醬中人工合成著色劑檢測的液相色譜圖
果醬中人工合成著色劑檢測(空白樣品)的液相色譜圖
添加水平為10 mg/kg果凍中人工合成著色劑檢測的液相色譜圖
果凍中人工合成著色劑檢測(空白樣品)的液相色譜圖
添加水平為10 mg/kg冰淇淋中人工合成著色劑檢測的液相色譜圖
冰淇淋中人工合成著色劑檢測(空白樣品)的液相色譜圖
添加水平為10 mg/kg乳飲料中人工合成著色劑檢測的液相色譜圖
乳飲料中人工合成著色劑檢測(空白樣品)的液相色譜圖
添加水平為10 mg/kg糖果中人工合成著色劑檢測的液相色譜圖
糖果中人工合成著色劑檢測(空白樣品)的液相色譜圖
添加水平為10 mg/kg水果罐頭中人工合成著色劑檢測的液相色譜圖
水果罐頭中人工合成著色劑檢測(空白樣品)的液相色譜圖
添加水平為10 mg/kg黑芝麻糊中人工合成著色劑檢測的液相色譜圖
黑芝麻糊中人工合成著色劑檢測(空白樣品)的液相色譜圖
添加水平為10 mg/kg紅酒中人工合成著色劑檢測的液相色譜圖
紅酒中人工合成著色劑檢測(空白樣品)的液相色譜圖
食品中人工合成著色劑的測定相關產品信息：
貨號 | 名稱 | 規格 |
樣品前處理 | ||
65815 | 若陰離子交換固相萃取柱 ProElut PWA-2 | 150 mg/6 mL, 30/pk |
244358 | 12管防交叉污染真空SPE萃取裝置 | 12位 |
4803 | 1,3,6mL柱管通用連接器 | 15/pk |
4806 | 考克(控制流量) | 15/pk |
99011 | 真空/正壓兩用泵，無油 | 1/pk |
99013 | 抽濾瓶套裝 (包括硅橡膠管2米,2L抽濾瓶及橡膠塞) | 1/pk |
30039 | FitMax針頭式過濾器 Nylon | 13 mm,0.22 μm 100/pk |
30040 | FitMax針頭式過濾器 Nylon | 13 mm,0.45 μm 100/pk |
標準品 | ||
56-03322-25MG | 酒石黃/檸檬黃[1934-21-0] | 25mg ≥99.0% (HPLC) |
56-87612-25MG | 莧菜紅[915-67-3] | 25mg ≥98.0% (HPLC) |
54-229296-25G | 靛藍[482-89-3] | 25g Dye content, 95% |
50P-C15506000 | 新紅[220658-76-4] | 100 mg |
56-68775-25MG | 日落黃[2783-94-0] | 25mg ≥95% (HPLC) |
50P-C10665200 | 亮藍[3844-45-9] | 250 mg |
56-87613-25MG | 赤蘚紅/藻紅[16423-68-0] | 25mg ≥98.0% (HPLC) |
56-38213-25MG | 誘惑紅[25956-17-6] | 25mg ≥98.0% (HPLC) |
色譜柱及保護柱 | ||
81006 | 反相液相色譜柱 Inspire C18 | 250 × 4.6 mm, 5 μm |
6201 | EasyGuard C18 保護柱 | 10 × 4.0 mm 1/pk 2個柱芯+1個柱套 |
HPLC溶劑?緩沖鹽?離子對試劑 | ||
50102 | 甲醇 HPLC級 | 4 L |
50101 | 乙腈 HPLC級 | 4 L |
50108 | 乙醇 HPLC級 | 4 L |
50144 | 甲酸 HPLC級 | 50 mL |
50138 | 乙酸銨 HPLC級 | 100 g |
通用色譜產品 | ||
52401B | 瓶架/藍色（現貨） | 50孔 |
52401A | 瓶架/白色（現貨） | 50孔 |
1034 | 樣品瓶（棕色/螺紋） | 2 mL, 100/pk |
1035 | 樣品瓶蓋/含墊（已經組裝） | 100/pk |
H80465 | HPLC 進樣針 | 25 μL |
紅色產品貨號#30039、#30040、#1034、#1035*
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