ELISA試劑盒使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。

根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復孔的盡量做復孔。
加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。
甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。
在450nm波長處測定各孔的OD值。

建議使用的實驗方案

6號標準品以上的結果為非線性的，根據(jù)此標準曲線無法得到的結果。

試劑盒性能

1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。

2. 特異性：不與其它細胞因子反應。

3. 重復性：板內、板間變異系數(shù)均小于10%。

結 果 判 斷 與 分 析

1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的ICA標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的ICA含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

3、檢測值范圍：0-40mIU/ml

4、敏感度： 0.1 mIU/ml

SEPT12    細胞分化蛋白SEPT12抗體
SNIP1    Smad核相互作用蛋白1抗體
Syntaxin 6    突觸融合蛋白6抗體
Sprouty1    軟脂酰化磷蛋白Sprouty1抗體
SH3TC2    脫髓鞘相關蛋白SH3TC2N抗體
SHANK2    富含脯氨酸突觸相關蛋白SHANK2抗體
SHARPIN    線性泛素鏈相關蛋白SHARPIN抗體
SAMD7    SAMD7蛋白抗體
SAMD3    SAMD3蛋白抗體
Syntrophin gamma 2    肌蛋白結合蛋白γ2抗體
SOX22    核轉錄因子SOX22抗體
SOX4    核轉錄因子SOX4抗體
SUFU/Suppressor of Fused    抑制Hh信號通路蛋白SUFU抗體
SNAIL    Snail蛋白抗體
SARP1    分泌細胞凋亡相關蛋白1抗體
SMARCD3    肌動蛋白依賴染色質調控因子SMARCD3蛋白抗體
SLC26    線粒體載體腺嘌呤核苷酸轉運蛋白6抗體
SODD    Bcl2結合抗凋亡蛋白4抗體
C10orf27    第10號染色體開放閱讀框27抗體
5-HTR2A    5-羥色胺受體2A抗體
5 lipoxygenase    5-脂氧合酶抗體

ELISA試劑盒