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淋巴細胞功能測定同時減少副作用新技術

來源:通蔚試劑(上海)有限公司   2016年05月03日 23:12  

淋巴細胞功能測定同時減少副作用新技術
根據對體內細胞生長的激發不同,可以把淋巴細胞功能檢測的方法大致分為兩大類:抗原特異性和多克隆性。只有以前接觸過抗原的個體的細胞,才能被激發出針對特異性抗原的陽性反應,但所有正常個體的細胞,都可被激發出多克隆活性因子的陽性反應。可用抗原,也可用多克隆活性物作激活物,陽性反應表明反應所需的細胞反應和細胞因子都以合適的比例出現。
抗原特異性遲發性過敏反應,即針對記憶抗原的T淋巴細胞反應,可以通過下列方法常規檢測。梯度離心,從外周血中獲得單核細胞,將單核細胞與培養孔內不同濃度的檢測抗原結合,該培養孔中含生長基質和固定量的細胞。在免疫的個體中,T淋巴細胞識別已被處理的抗原,經激活的巨噬細胞產物白細胞介素-1和T淋巴細胞分泌的生長因子白細胞介素-2的誘導,T淋巴細胞發生增殖。88在培養基中加入放射性核素標記的脫氧核糖核酸(DNA)(3H-胸腺嘧啶脫氧核苷),就可以檢測激活的T淋巴細胞的增殖。通過測定放射性核素與細胞內DNA的結合,可以確定增殖反應的量。與只含培養基不含抗原的培養孔的細胞相比,含抗原的培養孔中生長的細胞內DNA結合的3H-胸腺嘧啶脫氧核苷增加,表明反應呈陽性。不同的免疫個體,增殖反應的程度不同。增殖反應取決于好幾個因素,包括體內接觸抗原后,過去的時間,個體的年齡和抗原的化學特征。
某些常見抗原(如白色念珠菌和用于誘導特異性免疫的抗原,如破傷風毒素。)對評價個體產生遲發性過敏反應的整體功能是有用的。體內對這些抗原無反應,表明有T細胞參與的細胞介導的免疫缺陷。其他在環境中不常見的抗原,在評價免疫缺陷的作用或某些疾病狀態時的特異性遲發過敏反應也有用。例如,已經發現在某些復發彌漫性組織胞漿菌病的病人體內缺乏對組織胞漿菌素抗原的遲發性過敏反應。已有人提到,該異常反映了宿主免疫反應已獲缺陷,而宿主免疫反應在允許莢膜組織胞漿菌體內生長中起重要作用。
多克隆激活因子,也叫有絲分裂原,它通過結合細胞膜糖蛋白的碳氫部分,而誘導淋巴細胞的增殖。許多常用的多克隆激活因子取自植物提取物,被稱為植物凝集素。不同的植物凝集素以不同的程度刺激不同的淋巴細胞亞群。臨床實驗室zui常用的是刀豆球蛋白A(con A)和植物血細胞凝集素(PHA),它們都能很顯著地刺激T淋巴細胞。還有美洲商陸有絲分裂原,在有巨噬細胞出現的情況下,它能刺激培養的T和B細胞。美洲商陸有絲分裂原也叫T細胞依賴性B細胞有絲分裂原。

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