以下是關(guān)人γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明，綜合整理自不同來(lái)源的可靠信息：

　　BS-0383人γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒

　　一、實(shí)驗(yàn)原理?

　　該試劑盒采用?雙抗體夾心法ELISA技術(shù)?：

　　將捕獲抗體包被于微孔板上，結(jié)合樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的待測(cè)物IFI16p16。

　　加入生物素標(biāo)記的檢測(cè)抗體，形成“捕獲抗體-抗原-檢測(cè)抗體”復(fù)合物。

　　通過(guò)鏈霉親和素偶聯(lián)的辣根過(guò)氧化物酶(HRP)催化底物TMB顯色，顏色深淺與待測(cè)物濃度成正比，最終通過(guò)酶標(biāo)儀測(cè)定吸光度(OD值)計(jì)算濃度。

　　二、試劑盒組成與儲(chǔ)存?

　　主要組分?：

　　包被抗體、檢測(cè)抗體、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記物、顯色液(TMB)、終止液等。

　　儲(chǔ)存條件?：

　　未開(kāi)封試劑盒需2-8℃避光保存;部分組分(如顯色液)需嚴(yán)格避光。

　　有效期?：通常為6個(gè)月，具體以標(biāo)簽為準(zhǔn)。

　　三、樣品處理要求?

　　血清/血漿?：

　　采集后室溫靜置2小時(shí)或4℃過(guò)夜，1000×g離心20分鐘，取上清保存于-20℃(避免反復(fù)凍融)。

　　組織勻漿?：

　　用預(yù)冷PBS沖洗組織，按1:9(重量體積比)勻漿，離心取上清。

　　注意事項(xiàng)?：

　　避免溶血、高血脂或含NaN3的樣本(NaN3抑制HRP活性)。

　　四、操作步驟?

　　試劑準(zhǔn)備?：

　　標(biāo)準(zhǔn)品需現(xiàn)用現(xiàn)配，不可保存;洗滌液按1:50稀釋。

　　加樣與孵育?：

　　依次加入標(biāo)準(zhǔn)品/樣品、檢測(cè)抗體、HRP標(biāo)記物，每步需充分洗滌。

　　顯色與讀數(shù)?：

　　加入TMB顯色10-30分鐘，終止液終止反應(yīng)后，立即用450nm波長(zhǎng)測(cè)OD值。

　　五、注意事項(xiàng)?

　　安全防護(hù)?：

　　避免接觸終止液和底物(有毒)，操作時(shí)戴手套，勿用嘴吸取試劑。

　　實(shí)驗(yàn)細(xì)節(jié)?：

　　加樣順序一致，避免氣泡;洗滌需拍干;顯色液避光保存。

　　質(zhì)量控制?：

　　每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品建議做復(fù)孔;超出檢測(cè)范圍需稀釋后重測(cè)。

　　六、常見(jiàn)問(wèn)題?

　　顯色異常?：若孔內(nèi)呈綠色，表明終止液未混勻。

　　數(shù)據(jù)偏差?：可能由樣本處理、試劑批次或儀器誤差引起，需重復(fù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。

　　注：以上資料僅供參考，如需更詳細(xì)的操作圖示或標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制方法，可參考試劑盒附帶的說(shuō)明書(shū)或聯(lián)系供應(yīng)商獲取技術(shù)支持。

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